内容正文:
第一章
发酵工程
1.2.1 微生物的基本培养技术
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传统发酵技术的缺点
菌种差异、杂菌情况不明、发酵过程的控制缺乏标准等,往往会造成发酵食品的品质不一。
为了缩短发酵时间,确保品质稳定,工业上大规模生产时,通常先通过微生物培养技术获得单一菌种,再将它们接种到物料中进行发酵。
从社会中来
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌,再经过发酵就可以制成酸奶,由于制作工艺并不复杂,一些人会在家里自制酸奶,自制酸奶虽然方便,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜,主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么,怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?
应该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制发酵条件,避免杂菌进入。
这需要应用无菌技术和微生物的培养技术
19世纪中期,法国酿酒业曾一度遭到毁灭性打击,生产的葡萄酒出现了变酸变味的怪事…
法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了微生物。
一、微生物
个体无法用肉眼观察的微小生物。微生物包括:细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体。
微生物:
一、微生物
酵母菌
青霉菌
球菌
蓝细菌
草履虫
衣藻
新冠病毒
1)病毒类:
病毒、类病毒、朊病毒
(需寄主活细胞作为培养基)
2)原核类:
3)真核类
细菌、支原体、放线菌、蓝细菌
真菌(酵母菌、霉菌、食用菌)
原生生物(藻类、原生动物)
放线菌
一、微生物
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实验室培养微生物条件
1)提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
——培养基
2)确保其它微生物无法混入
——无菌技术
微生物结构简单、形体微小,眼睛看不到,若想得到纯净的微生物,就必须对其进行培养和分离。
高压蒸汽灭菌
防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提,也是发酵工程的重要基础。
一、微生物
人们按照__________________________,配制出供其生长繁殖的营养基质,即培养基。
1.培养基的概念、作用及类型
(1)概念:
微生物对营养物质的不同需求
(2)作用:
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(3)类型:
液体培养基
固体培养基
菌落
不含凝固剂(如琼脂)
在液体培养基中加入琼脂后制成的琼脂固体培养基,是实验室中最常用的培养基之一
呈液态状态
微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长形成肉眼可见的菌落
二、培养基的配制
(4)培养基的成分
营养要素 来源 功能
碳源 无机碳源 CO2、NaHCO3等含碳无机物 构成细胞物质和一些代谢产物;
有机碳既是碳源又是能源
有机碳源 糖类、牛肉膏、脂质、蛋白质、有机酸、石油等
氮源 无机氮源 N2、NH3,氨盐、硝酸盐等 将无机氮合成含氮的代谢产物
有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 合成蛋白质、核酸和含氮的代谢废物
生长因子 维生素、氨基酸、碱基 酶和核酸的组成成分;
参与代谢过程中的酶促反应
水 外界摄入 良好的溶剂;
维持生物大分子结构的稳定
无机盐 无机物 提供除碳、氮以外的各种重要元素
二、培养基的配制
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等
(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)
表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000ml 水
(4)培养基的成分
牛肉膏是采用新鲜牛肉经过消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有牛肉自然香味,易溶于水,水溶液呈淡黄色。
蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂。一般用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(肉类)和植物蛋白(豆类)等两种。
二、培养基的配制
在主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长的条件有:对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
微生物培养基是否都需要人工添加碳源或氮源?
培养基不一定都含有碳源、氮源,如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源,分离自生固氮菌的培养基中,不需加入氮源。
二、培养基的配制
例如:培养乳酸杆菌需添加维生素;
培养霉菌需调至酸性;
培养细菌需调至中性或弱碱性;
培养厌氧微生物需提供无氧环境。
pH要适宜:为维持pH的相对恒定,可在培养基中加人缓冲剂,常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。
补充资料:培养基的类型及用途
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
用途
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、
分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质