内容正文:
第3章 基因工程
3.1 重组DNA技术的基本工具
从社会中来
我国是棉花的生产和消费大国,棉花在种植过程中,常会受到一些虫害的侵袭,其中以棉铃虫最为常见,它可以使棉花产量减少三分之一,甚至绝收。
大量施用农药
×
苏云金杆菌中存在一种毒蛋白基因,编码出的毒蛋白能杀死害虫。能不能将“杀虫基因”导入到棉花细胞中,使棉花自身产生抗虫蛋白来抵抗棉铃虫呢?
抗虫基因
转基因
基因工程
基因工程
是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫 重组DNA技术。
基因
分子水平
基因重组
赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品
定向改造生物性状
2.原理:
3.操作对象:
4.操作水平:
5.结果:
6.意义:
基因工程
基因工程的理论基础
1.棉花和苏云金杆菌的遗传物质都是 。
2.不同生物的DNA分子能够拼接在一起,原因是
。
3.同一种基因在不同生物体内表达出来的蛋白质相同,因为
。
4.遗传信息的传递都遵循 法则。
DNA
基因的组成单位、空间结构、碱基互补配对方式相同
所有生物共用一套遗传密码
中心
思考:为何不同生物的DNA分子能拼接起来,为何一种
生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?
理论—技术—产品
1
2
阐明重组DNA技术所需的三种基本工具的作用。
认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
学习目标
目
生物学
高中
一、“分子手术刀”——限制性内切核酸酶(限制酶)
6
1.来源:
2.种类:
3.特点:
主要来自原核生物
数千种(限制酶不是一种酶,而是一类酶)
能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
能不能根据所学知识推测出限制酶存在于原核生物中的意义?
切割外源DNA,对自身DNA不起作用,起到保护自身的目的。
A
T
C
G
T
A
G
C
5’
3’
5’
3’
①
②
氢键
磷酸二酯键
P71旁栏思考
(具有专一性)
一、“分子手术刀”——限制性内切核酸酶(限制酶)
EcoRI识别序列
(在G与A之间切割)
SmaI识别序列
(在G与C之间切割)
5'
5'
3'
3'
5'
5'
3'
3'
黏性末端
平末端
一、“分子手术刀”——限制性内切核酸酶(限制酶)
限制酶名字的由来
EcoRⅠ
属名Escherichia首字母
种名coli 前两个字母
R型菌株
从中分离的第一个限制酶
例如:流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)d株中先后分离到3种限制酶,则分别命名为:
Hind I
Hind II
Hind III
资料卡
一、“分子手术刀”——限制性内切核酸酶(限制酶)
AGTCGAATTC…………Bt…………GAATTCACCCGGGT
TCAGCTTAAG………基因…………CTTAAGTGGGCCCA
1.思考讨论要想获得Bt基因需要用限制酶切几个切口;
2.小组合作,商讨后确定切割位置;
3.由组长做“主刀人”,尝试操作,将Bt基因“切割”下来;
4.想一想用限制酶把Bt基因切下后,一共产生了几个末端,断了几个磷酸二
酯键,产生了几个游离的磷酸集团?
AATTC………Bt………G
G……基因………CTTAA
AGTCG
TCAGCTTAA
AATTCACCCGGGT
GTGGGCCCA
4个黏性末端
4个
4个
2个
实践活动:用剪刀模拟EcoRI的作用获取Bt基因
二、“分子缝合针”——DNA连接酶
将两个DNA片段连接起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
G
C T T A A
A A T T C
G
G
C T T A A
A A T T C
G
用DNA连接酶连接两个片段之间的磷酸二酯键
1
作用:
二、“分子缝合针”——DNA连接酶
种类 ___________________
___________________
来源 大肠杆菌 T4噬菌体
作用
差别 只连接____________ 缝合___________和____________
E.coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
黏性末端
黏性末端
平末端
(