1.2 微生物的培养技术及应用学历案-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修三

高二年级生物学学历案 我们要以激情饱满的面貌迎接每一天 班级： 姓名： 高二生物学学历案 1.2微生物的培养技术及应用(2) 【课标要求】 1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的基础 2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品和无菌区域不被微生物污染的技术。 3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。 5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物 【学习目标】 1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求，进行酵母菌的纯培养。 2.阐明微生物选择培养的原理。 3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【学习重点】 1.微生物纯培养的基本操作要求，微生物选择培养的原理。2.酵母菌的纯培养。3.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【学习过程】 ____________________（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用_______的DNA聚合酶。1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而提取出_____的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于_______________（PCR）。 【思考】1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的？ 2. 为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？ 这是因为水生栖热菌能在_______________条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 一、选择培养基 1.概念：在微生物学中，将允许__________的微生物生长，同时_____或_____其他种类微生物生长的培养基。 2.类型： （1） 利用改变培养条件进行选择培养。 _______________→分离耐高温的水生栖热菌。 （2）利用添加某种化学物质进行选择培养。 加入_____→分离酵母菌、霉菌等真菌。 加_____________→金黄色葡萄球菌。 （3）利用营养缺陷进行选择培养。 不加碳源（含碳有机物）的培养基→分离出_______微生物。 ________的培养基→分离出固氮菌。 【思考·讨论·选择培养基配方的设计】 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 二、微生物的选择培养 如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，还需要对土样进行适当的处理以及科学的测定微生物数量的方法——_______________法。 1.稀释涂布平板法 将菌液进行一系列__________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到__________培养基的表面，进行培养。 基本操作：（1）______________________；（2）______________________。 2.实验操作流程 ①铲取土样，将样品装入纸袋中。②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。④将_____浸在盛有_____的烧杯中。⑤将_____放在火焰上灼烧，待_____燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可_______________，使涂布均匀。 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板_____，放入30～37℃的恒温培养箱中培养1～2d，在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的__________。 注意事项： ①10g土样加入盛有90mL无菌水中后，已__________，在计算时，不要忽略； ②由于使用的是_____培养基，所以一般情况下，获得的单菌落即目的菌，但因为有些微生物可以利用目的菌的代谢产物来生长繁殖，所以还需要进一步验证； ③过程中所有操作都应在_______________旁进行； ④将涂布器从_____中取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧；不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃酒精。 三、微生物的数量测定 1.间接计数法——_______________法 （1） 原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的__________