1.2 微生物培养技术与应用1课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

1.1 传统发酵技术 天然的菌种，质量不可控 易被杂菌污染 1.2 微生物培养技术与应用 第1课时 2 生物分类 生物 细胞 生物 非细胞生物 病毒 真核 生物 原核 生物 细菌 动物 植物 真菌 蓝藻 微 生 物 其他 原生生物 新冠病毒 乳酸杆菌 霉菌 衣原体 本节微生物培养：主要指用于发酵的细菌和真菌 4 ☆实验室培养微生物的基本思路： ①为微生物提供合适的营养 ③确保其他微生物无法混入 ②为微生物提供合适的环境条件 ④将需要的微生物分离出来 培养基 培养环境 无菌技术 分离纯化 微生物培养技术 5 一、培养基 1、定义： 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 2、种类 液体：（工业生产） 固体：（微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种） 半固体：（观察微生物运动、鉴定菌种） 1）物理状态： 加凝固剂--琼脂等 液体培养基 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 （工业生产） 半固体培养基 无动力 有动力(弥散) (是否运动？) （观察微生物运动、鉴定菌种） 固体培养基：菌落 （微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种） 菌落 单个或少数微生物细胞 b、特征： 大小、形状、光泽度、 颜色、透明度等。 c、功能： a、定义： 菌落 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 (肉眼可见） 2）功能： 选择培养基： 加入某种化学物质，抑制不需要的微生物，促进需要的微生物生长，从众多微生物中分离出所需微生物 鉴别培养基： 加入某种指示试剂或化学药瓶，根据微生物的代谢特点，鉴别不同种类的微生物 3）化学成分： 天然培养基： 化学成分不清楚或成分不恒定的天然有机物，（工业生产） 合成培养基： 成分明确（分类鉴定） 水分 碳源：提供碳元素的物质 氮源：提供氮元素的物质 无机盐 培养基 01 （自养微生物） ★无机碳源 —— CO2 、 CO32- 、 HCO3-等 ★有机碳源 —— 葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等 （异养微生物） ★有机氮源 —— 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 ★无机氮源 —— NH4＋ 、 NO3- 、 NH3等 13 一、培养基 1）基本成分：碳源、氮源、无机盐和水等 3、培养基的成分 ⑴碳源：提供C元素 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 糖类、脂肪等（牛肉膏、蛋白胨等） 自养微生物 异养微生物 思考： 1.大肠杆菌，硝化细菌，蓝细菌，乳酸菌分别选用哪种碳源？ 糖类，二氧化碳，二氧化碳，糖类 ⑵氮源：提供N元素 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注： 含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 （3）无机盐： 除C、N外的各种元素、（大气和培养基） （4）水： 培养基 01 只需要这些物质就好了吗？ 其他条件 pH、O2和特殊营养物质 水 碳源 氮源 无机盐 ①pH 、O2 培养霉菌 培养细菌 培养厌氧微生物 培养基pH调至酸性 培养基pH调至中性或弱碱性 控制培养环境为无氧 ②特殊营养物质 主要指生长因子 ▲概念：是一类调节微生物正常生长代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。 ▲种类：维生素、碱基、卟啉、胺类等 ▲来源：酵母膏、玉米浆、麦芽汁、蛋白胨、动植物组织提取液等 17 3、培养基的成分： 2）特殊营养： 生长因子 生长必不可少的微量有机物(维生素、氨基酸、碱基等) 乳酸菌：维生素 牛肉膏、蛋白胨中含有 4、pH、氧气： PH:霉菌：酸性；细菌：中性或碱性 厌氧微生物：无氧 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g NaCl 5g H2O 定容至1000mL 牛肉膏蛋白胨培养基 碳源、磷酸盐和维生素等 氮源和维生素等 无机盐 水 培养基 01 应用最广泛培养基 19 二、无菌技术 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，防止杂菌污染的操作技术 1、目的：（1）防止培养物被污染（2）防止感染实验操作者。 ★无菌操作的对象： ①实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒 ② 培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 无菌操作过程中，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。 无菌技术 02 21 2、方法： ①消毒 无菌技术 02 ②灭菌 22 1）消毒 （1）概念：使用较温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 （2）方法： ①煮沸消毒法：100℃、5-6min。 可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。 ②巴氏消