内容正文:
课题
1.2.2 微生物的选择培养和计数
课型
新授课
主备人
审核人
高二生物备课组
学习目标
1.学会用生物与环境相适应的观点理解选择培养的原理
2.学会通过调整培养基的配方来有目的地培养某一种微生物
3.学会用多种方法测定微生物的数量(渗透法制教育)
学习重点
1.通过调整培养基的配方来有目的地培养某一种微生物
2.学会用多种方法测定微生物的数量
学习难点
通过调整培养基的配方来有目的地培养某一种微生物
课时
3课时
教学过程
批注
【课前—基础梳理】
一、选择培养基
1.自然界中目的菌的筛选:从目的菌株生存的 中找。
实例:聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶,是从热泉中筛选出来的
中提取出来的。因为水生栖热菌能在 ℃的高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
2.选择培养基:允许 的微生物生长,同时 其他种类微生物生长的培养基。
3.实验室中目的菌的筛选
(1)原理:人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度和pH等),同时 其他微生物的生长。
(2)方法:利用 培养基分离。
二、微生物的选择培养
1.方法:对样品进行充分 ,然后将 涂布到制备好的 培养基上。也就是采用稀释涂布平板法。
2.稀释涂布平板法的操作过程:系列稀释操作 涂布平板操作 培养观察
三、微生物的数量测定
1.稀释涂布平板法
(1)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少 。
(2)计数原则:
①一般选择菌落数为 的平板进行计数。样品的 将直接影响平板上的菌落数目,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。
②在一同稀释度下,应至少对 个平板进行重复计数,然后求出 。
(3)结果分析:统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是 。因此,统计结果一般用 而不是用活菌数来表示。
(2)计算公式
每克样品中的菌株数= 。
2.显微镜直接计数法:是一种常用的、快速 的测定微生物数量的方法。
(1)原理:利用特定的细菌计数板或 ,在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中微生物的数量,。
(2)结果:统计的结果一般是 的总和。
四、微生物两种两种接种方法的比较
主要方法
平板划线法
稀释涂布平板法
主要步骤
在 体培养基
表面 划线
系列 操作和 操作
接种工具
能否用
于计数
,但是操作复杂,需涂布多个平板
培养结果
共同点
都能将微生物分散到固体培养基表面,以获得单细胞菌落,达到分离纯化微生物的目的,也可用于观察菌落特征
【课中—核心探究】
探究活动一 选择培养基
1.如何从大豆田土壤中分离出固氮微生物?
2.要分离出分解纤维素的微生物,应在什么样的环境中取土样?应配制什么样的培养基?
3.根据选择培养基的原理,如何筛选出耐酸菌?
4.要把某种微生物从众多微生物中筛选出来,就要利用其代谢特点选择合适的培养基。下面是分离土壤中分解尿素的细菌使用的选择培养基配方,请分析回答问题。
KH2PO4
1.4 g
Na2HPO4
2.1 g
MgSO4·7H2O
0.2 g
葡萄糖
10.0 g
尿素
1.0 g
琼脂
15.0 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL
(1)在该培养基的配方中,为微生物提供碳源的是____________,提供氮源的是________。
(2)绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能利用________。
(3)分析该培养基的配方,该培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何进行选择的?
(4)判断选择培养基是否具有筛选作用