内容正文:
第二章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
从古至今,我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征,很多人喜欢养兰花,但是,兰花种子通常发育不全,在自然条件下萌发率极低;传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题,如果靠自然繁殖,兰花的价格可想而知了,如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖,从而走入寻常百姓家呢?
从社会中来
植物通常是通过播种或扦插实现繁殖的。
落地生根
玉米种子萌发
黄豆种子发芽
细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能,即细胞的全能性。
植物组织培养的基本原理
为什么植物组织或细胞能培养成完整植物体?
从社会中来
1958年美国科学家将胡萝卜韧皮部一些细胞培养获得了完整的新植株。
已分化细胞
脱分化
愈伤组织
再分化
胚状体
再分化
试管苗
完整个体
这就是植物组织培养技术
※细胞全能性表现的必要条件:
(3)适宜的外界条件(适宜的温度、pH、无菌无毒的环境等);
(2)一定的营养物质(无机盐、维生素、氨基酸等)和植物激素;
(1)离体
温故知新
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生物体内的细胞在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性的表达,即发生细胞分化。如芽原基的细胞只能发育为芽,叶原基的细胞只能发育为叶。
一、植物组织培养技术
指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
1. 植物组织培养的概念
统称外植体
原理:植物细胞的全能性
一、植物组织培养技术
叶子
花瓣
花粉
细胞
植物体
分化程度越低,全能性越高:
受精卵>胚胎干细胞>
生殖细胞>体细胞)
一、植物组织培养技术
2、基本过程:
脱分化
再分化
愈伤组织
或胚状体
幼根和芽
外植体
完整植株
(离体的植物器官、组织或细胞)
发育
移栽成活
脱分化
再分化
一、植物组织培养技术
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脱分化
让已经分化的细胞,经过激素诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。
愈伤组织
排列疏松无规则,无定形状态,高度液泡化的薄壁细胞。
注意:无叶绿体,可进行有丝分裂
适温、避光
见光后愈伤组织形成维管组织,变为绿色
脱分化形成愈伤组织是需要避光的,如果有光怎么办呢,就会形成维管组织,不利于愈伤组织的形成,形成愈伤组织后,再分化要进行光照条件,因为愈伤组织进一步发育成胚状体和丛芽过程中,需要合成叶绿素,合成叶绿素就需要光照,所以再分化的过程中,我们需要进行光照。
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再分化
脱分化产生的愈伤组织在一定培养条件下再分化成幼根和芽,或胚状体,进而形成小植株的过程。
①实质 ______________
②结果_____________________________________
______________
③光照条件:_________________________
为什么?_____________________________________
④过程中涉及的生命活动
__________________________________________
基因的选择性表达
再分化芽、根等器官,或再分化成胚状体后长出芽和根,进而发育成完整的植株
需要给予适当时间和强度的光照
诱导叶绿素的合成,使试管苗能够进行光合作用
既有细胞增殖(有丝分裂),又有细胞分化
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P35【探究˙实践】第1段
决定植物脱分化、再分化的关键因素?
生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。。
巧记:高根低芽中愈伤
生长素和细胞分裂素的比例和浓度都会影响植物细胞的发育方向。
低→利于芽的分化
高→利于根的分化
适中→利于愈伤组织的形成
适宜的激素比例
细胞分裂素
生长素
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菊花的组织培养
方法步骤:
1.消毒
双手和超净工作台
酒精擦拭
外植体(幼嫩的茎段):
酒精消毒
30s
无菌水
2~3次
次氯酸钠
30min
无菌水
2~3次
注意:实验使用的培养基和所有机械都要灭菌。接种操作必须在酒精灯火焰旁进行,并且每次使用后的机械都要灭菌。
一、植物组织培养技术
用解剖刀将外植体切
成0.5~1cm长的小段
将消过毒的外植体
置于无菌培养皿中
用无菌滤纸吸去
表面的水分
超净工作台无菌操作
2.外植体的切段
在酒精灯火焰旁,将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基