专题13 基因工程-【好题汇编】2024年高考生物一模试题分类汇编（山东专用）

专题13 基因工程 （2024届山东省滨州市高三3月模拟）25. 研究人员利用水稻细胞培育能产生人 HIV 抗体2G12 的水稻胚乳细胞生物反应器，其基本流程包括表达载体的构建、农杆菌转化、水稻细胞转化、转基因植株的筛选等。 （1）为成功构建表达载体，需在人工合成的人 HIV 抗体2G12 基因首端添加启动子，你的选择是 （填字母），依据是 。 A. 人 B 细胞启动子 B. HIV启动子 C. 水稻胚乳细胞启动子 D. 农杆菌启动子 （2）潮霉素对原核细胞和真核细胞的生长都有抑制作用。据此分析，下图所示重组T-DNA片段中潮霉素抗性基因为基因表达载体中的________，其作用是________。 （3）目的基因插入染色体的具体位置通常具有不确定性，可采用反向PCR 技术检测。下图是利用这一技术分析人 HIV 抗体2G12 基因插入染色体位置的流程图。 欲得到图中环状 DNA，过程Ⅰ酶切时_______（填“能”或“不能”） 利用不同限制酶。由图中环状DNA至少经过________轮循环才能得到图示链状产物。 （4）与其他工程技术相比，利用水稻生产人 HIV 抗体2G12 的优势有________（答两点即可）。 （2024届山东省德州市高三一模）25. 哺乳动物体内一定含量的w-3多不饱和脂肪酸(LCPUFA)可以起到预防心血管疾病的作用，但LCPUFA在大多数动物体内不能合成，只能从食物中摄取。科研人员从秀丽隐杆线虫中获得LCPUFA合成酶基因fat-1(1229bp),培育转fat-1基因家兔，其部分流程如图一所示。 （1）PCR扩增fat-1基因的前提是______，以用于特异性制备PCR扩增需要的引物。PCR扩增过程中，经过4轮循环后，得到的产物中只含一种引物的DNA分子占比为_______。 （2）在构建PEBf质粒时，为确保fat-1基因按正确方向插入，需要双酶切，还需对fat-1基因的引物进行相应设计。已知fat-1基因转录的模板链为a链，与b链结合的引物5'端添加了限制酶识别序列GAATTC,则另一引物5’端需添加的限制酶识别序列为______,理由是_______。 （3）转染是将外源分子如DNA、RNA等导入真核细胞的技术。为了检验图一家兔成纤维细胞是否转染成功，科研人员分别提取培养液中各细胞的DNA，利用fat-1基因引物进行PCR扩增后电泳，部分结果如图二所示。据图分析，1组和2组分别是____细胞组PCR产物。 （4）检测转基因家兔细胞中是否含有LCPUFA合成酶，可采用______技术。如果fat-1基因已正确插入PEB质粒且成功转染，但在转基因家兔细胞中没有检测到LCPUFA合成酶，从构建基因表达载体的角度分析，可能的原因是_______。 （2024届山东省菏泽高三一模）25. 透明质酸（HA）又称玻尿酸，是重要的医学材料和化妆品添加原料。枯草芽孢杆菌无透明质酸合成酶（HAS），但含有HA代谢的其它途径，而链球菌含有HAS的基因（H基因）。研究者通过基因工程来改变枯草芽孢杆菌代谢通路，以实现枯草芽孢杆菌生产HA。 （1）目的基因的获取和扩增：从链球菌获取H基因，为通过外源添加诱导剂来控制H基因的表达，研究者选择含木糖诱导型启动子的p质粒作为H基因的运载体，其中EcoRV酶切位点的识别序列为5'-GATATC-3'，XbaI酶切位点的识别序列为5'-TCTAGA-3'。H基因以a链为转录模板链，据此推测H基因的转录从其______（填“左侧”或“右侧”）开始。利用PCR扩增H基因时，需依据图中已知碱基序列及以上信息，设计的引物碱基序列为______（写出5'端的10个碱基），引物的作用是________________________。 （2）基因表达载体的构建：用XbaI酶和EcoRV酶处理目的基因和p质粒，然后加入______酶催化重组质粒形成。 （3）目的基因的导入与筛选：将构建好的重组质粒转入经______处理的枯草芽孢杆菌，在含______的培养基上筛选，得到枯草芽孢杆菌A。 （4）菌种扩大培养与发酵：扩大培养的枯草芽孢杆菌A接种一定时间后添加______，诱导合成HA。HA对枯草芽孢杆菌来说属于______（填“初生”或“次生”）代谢产物。 （2024届山东省济宁市高三3月高考模拟考试 ）25. 为快速有效地检测汞污染，科研人员利用启动子J109和PmerT、汞响应蛋白（MerR）、绿色荧光蛋白（GFP）构建了非耦合双启动子汞全细胞生物传感器，其原理如图1所示。J109为组成型启动子，在不同细胞发挥作用的效果基本一致；PmerT为诱导型启动子，需要特定信号刺激后发挥作用。相关碱基序列和基因表达方向如下表所示。 启动子/结构基因 序列