内容正文:
植物细胞工程
第2章 细胞工程
细胞工程
应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
原理和方法
操作水平
目的
分类
细胞生物学、分子生物学和发育生物学
细胞器、细胞或组织水平
获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品
植物细胞工程和动物细胞工程
01
第1节 植物细胞工程
第1节 植物细胞工程
一、植物细胞工程的基本技术
(一)细胞的全能性
1.概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
2.生物体内细胞不能表现全能性的原因:在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会__________________。
(二)植物组织培养技术
1.概念:将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
2.理论基础:植物细胞的___________。
3.基本过程
(1)脱分化:在一定的___________等条件的诱导下,已经分化的细胞可以经过脱分化,即失去其特有的___________,转变成未分化的细胞,进而形成____________的过程。
(2)愈伤组织:脱分化产生的不定形的_________________。
(3)再分化:愈伤组织重新分化成__________等器官的过程。
选择性地表达
全能性
愈伤组织
激素和营养
结构和功能
薄壁组织团块
芽、根
4.菊花的组织培养
5.植物组织培养过程中应注意的问题
(1)实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌。接种操作必须在酒精灯火焰旁边进行,并且每次使用后的器械都要灭菌。
(2)接种时注意外植体的方向,应将外植体的形态学下端插入培养基,不能倒插。
(3)诱导愈伤组织期间一般不需要光照,在后续的培养过程中,每日要给予适当时间和强度的光照。
1.植物组织培养
(1)实验原理
外植体
愈伤组织
芽、根
完整植株
脱分化
再分化
生长发育
植物细胞一般具有全能性。
植物组织培养的过程
脱分化
再分化
让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程。
排列疏松无而无规则,是一种高度液泡化的,呈无定形状的薄壁细胞。
愈伤组织
愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。
2.为实现多肉植物的规模化生产,科研人员开展了如下研究。相关叙述正确的是( )
A.过程①宜选择成熟叶片,分别用次氯酸钠和70%的酒精浸泡30sB.过程②应避光培养,防止愈伤组织分化成筛管、维管等C.过程③应配制2种培养基,其主要目的是满足不同阶段试管苗对营养的需求D.过程④应在珍珠岩基质中添加适量蔗糖,为幼苗生长提供碳源
B
2.植物体细胞杂交技术
A细胞
B细胞
纤维素酶果胶酶
①去壁:
酶解法
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
②诱融
物理法:
化学法:
电融合法、离心法
聚乙二醇(PEG)融合法、
高Ca2+ —高PH融合法等
脱分化
再分化
移栽
植物细胞融合
植物组织培养
杂种植株
愈伤组织
A原生质体
B原生质体
移栽后的植株
①
①
②
与高尔基体有关
思考:两个标志指的是?
3.植物组织培养和植物体细胞杂交的比较
名称 植物组织培养 植物体细胞杂交
原理 细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性
过程
注意
事项 ①取材:选取有形成层的部位最容易诱导形成愈伤组织;
②光照:在愈伤组织分化出芽和叶时,一定要有光照,以利于叶片内叶绿素的合成 ①去壁方法:酶解法,所用的酶是纤维素酶和果胶酶;
②人工诱导融合的方法:
物理法:电融合法、离心法等;
化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等
联系 植物体细胞杂交技术包括植物细胞融合和植物组织培养两个过程,植物组织培养是植物体细胞杂交的一个环节,融合的体细胞只有通过植物组织培养才能发育成完整的个体
动物细胞工程
维持培养液的pH
动物细胞培养的条件
营养物质
其他条件
<
<
糖类
氨基酸
无机盐
维生素
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
1.动物细胞培养的条件
①培养液、培养用具:灭菌处理;
②无菌操作;③适量添加抗生素
定期更换培养液,以便清除代谢物防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜;
②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为________ ;
③适宜的渗透压:维持细胞正常的形态和功能。
④适宜的气体环境:
36.5±0.5℃
7.2-7.4
O2:细胞代谢所必需
培养皿或松盖培养瓶
95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱
7.灭活疫苗