内容正文:
1.2.2微生物的选择培养和计数
宁明
——盛产八角,2004年12月被国家林业部命名为“中国八角之乡”
宁明气候:年平均气温20—23℃,年平均相对
湿度80%,雨量充沛,空气湿润。
八角:适宜亚热带比较温暖潮湿的山谷,适宜生长温度20-30℃,
喜肥沃疏松、土层深厚的黄泥山地。
环境
生物
适应
南宁——盛产菠萝蜜
南宁气候:阳光充足,雨量充沛,霜少无雪,气候温和,年平均气
温在21.6℃左右。
菠萝蜜:喜热带气候、喜光。适生于无霜冻、年雨量充沛的地区。
环境
生物
适应
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启示1:根据微生物对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
耐寒微生物
耐热微生物
石油分解菌
自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时,仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。
稀释涂布平板法
呈现的杂菌群
去适宜环境中寻找→分离
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科学实例:寻找耐高温的DNA聚合酶
美国黄石公园
筛选原因:
因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物,而水生栖热菌能在70-800C高温条件下生存。
1966年,布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌,并分离到耐高温的DNA聚合酶。
耐高温的酶
耐高温生物体
高温环境(热泉、火山口)
寻找
寻找
PCR是一种在体外DNA复制的技术,此项技术要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。
启示2:实验室微生物的筛选时,人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和PH)等,同时抑制或阻止其他微生物生长。
8
01
一、选择培养基
1.概念:
2.类型:
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。
类型 条件 分离得到的菌种
改变培养条件 70~80℃的高温
添加某种化学物质 加入青霉素
高浓度食盐
限制营养条件(特殊碳、氮源) 石油是唯一碳源
营养缺陷 不加碳源
不加氮源
水生栖热菌
酵母菌、霉菌等真菌
金黄色葡萄球菌
能消除石油污染的微生物
自养型微生物
固氮菌
9
01
任务一:选择培养基配方的设计
尿素的立体结构
【思考·讨论】 教材P16
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。
尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。
而这些细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶。
脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以为细菌生长的氮源。
CO(NH2)2
脲酶
+ H2O
+ CO2
2NH3
10
01
选择培养基
2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
【思考·讨论】
除以尿素作为唯一氮源外,该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。
问
在选择培养基中,以尿素作为唯一氮源,只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。
1.将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
问
1. 研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌。判断下列相关表述是否正确。
(1)这种培养基是一种选择培养基。( )
(2)利用这种石油降解菌可以降解石油。修复土壤。
( )
(3)相对于未被污染的土壤,从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌。( )
√
√
√
教材20页 练习与应用
牛肉膏 5.0g
蛋白胨 10.0g
NaCl 5.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 定容到1000ml
培养基一
KH2PO4 1.4g
NaH2PO4 2.1g
MgSO4
·7H2O 0.2g
葡萄糖 10.0g
尿素 1.0g
琼脂 15.0g
蒸馏水 定容到1000ml
培养基二
2.从用途上来讲, 属于选择培养基,目的是为了获得 。
1.两种培养基共有的培养基成分有:
。
培养基一的主要碳源为 ,主要氮源为 ;
培养基二的碳源为 ,氮源为 。
培养基二
能分解尿素的微生物
碳源、氮源、无机盐、水
牛肉膏
蛋白胨
葡萄糖
尿素
判断