第3章 基因工程 单元统整 总结提升（Word教参）-【优化指导】2023-2024学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 单选版）

[对应学生用书P97] 1．限制酶主要是从哪里分离纯化出来的？有怎样的特点？ 答案：限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，其能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。 2．E.coli DNA连接酶与T4 DNA连接酶在功能上有什么不同？ 答案：E.coli DNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来，不能连接具有平末端的DNA片段；T4 DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端。 3．说出基因工程中的载体种类和作为载体的必备条件。 答案：目的基因通常用质粒作为载体，另外还有噬菌体和动植物病毒等。作为载体的必备条件：在宿主细胞中能保存下来并大量复制；有一个至多个限制酶切割位点；有特殊的标记基因，便于重组DNA分子的筛选；对受体细胞无害等。 4．说出利用PCR获取和扩增目的基因的原理和扩增过程。 答案：原理是DNA半保留复制。扩增的过程一般可以分为变性、复性和延伸三步。 5．说出基因表达载体的组成。 答案：基因表达载体除目的基因、标记基因外，还必须有启动子、终止子等。 6．将目的基因导入植物细胞、动物受精卵和大肠杆菌的方法有什么不同？ 答案：将目的基因导入植物细胞的方法有花粉管通道法和农杆菌转化法等，导入动物受精卵中最常用显微注射法，导入大肠杆菌需用Ca2+处理。 7．说出目的基因在分子水平上的检测方法。 答案：利用PCR等技术可以检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因或目的基因是否转录出了mRNA，利用抗原—抗体杂交技术可以检测目的基因是否翻译成相应蛋白质。 8．说出蛋白质工程的基本思路。 答案：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 1．(2023·湖北高考)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如下图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体(重组质粒)，并转化到受体菌中。下列叙述错误的是(　　) A．若用Hind Ⅲ 酶切，目的基因转录的产物可能不同 B．若用Pvu Ⅰ 酶切，在含Tet(四环素)培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用Sph Ⅰ 酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用Sph Ⅰ 酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落 D　解析：若用Hind Ⅲ 酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，转录的产物可能不同，A正确；若用Pvu Ⅰ 酶切，重组质粒和质粒中都有四环素抗性基因(TetR)，因此在含Tet(四环素)培养基中的菌落，不一定含有目的基因，B正确；DNA凝胶电泳技术可以分离不同大小的DNA片段，重组质粒的大小与质粒不同，能够鉴定重组质粒构建成功与否，C正确；Sph Ⅰ 的酶切位点位于四环素抗性基因中，若用Sph Ⅰ 酶切，重组质粒中含氨苄青霉素抗性基因(AmpR)，因此携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)的培养基中能形成菌落，在含Tet的培养基中不能形成菌落，D错误。 2．(2022·江苏高考)采用基因工程技术调控植物激素代谢，可实现作物改良。下列相关叙述不合理的是(　　) A．用特异启动子诱导表达iaaM(生长素合成基因)可获得无子果实 B．大量表达ip(细胞分裂素合成关键基因)可抑制芽的分化 C．提高ga2ox(氧化赤霉素的酶基因)的表达水平可获得矮化品种 D．在果实中表达acs (乙烯合成关键酶基因)的反义基因可延迟果实成熟 B　解析：生长素能促进果实发育，用特异启动子诱导表达iaaM(生长素合成基因)可获得无子果实，A正确；大量表达ip(细胞分裂素合成关键基因)，细胞分裂素含量升高，细胞分裂素与生长素的比值高时，有利于芽的分化，B错误；赤霉素能促进细胞伸长，从而引起茎秆伸长和植物增高，提高ga2ox(氧化赤霉素的酶基因)的表达水平可使赤霉素含量降低，从而能获得矮化品种，C正确；乙烯有催熟作用，在果实中表达acs (乙烯合成关键酶基因)的反义基因，可抑制乙烯的合成，果实成熟会延迟，D正确。 3．(2021·辽宁高考)腈水合酶(N0)广泛应用于环境保护和医药原料生产等领域，但不耐高温。利用蛋白质工程技术在N0的α和β亚基之间加入一段连接肽，可获得热稳定的融合型腈水合酶(N1)。下列有关叙述错误的是(　　) A．N1与N0氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之一 B．加入连接肽需要通过改造基因实现 C．获得N1的过程需要进行转录和翻译 D．检测N1的活性时先将N1与底物充分混合，再置于高温环境 D　解析：在N0的α和β亚基