第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数（Word教参）-【优化指导】2023-2024学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 单选版）

第2课时　微生物的选择培养和计数 课时目标 1.运用适应观，说明选择培养基的原理。(生命观念) 2．采用归纳与概括等方法，阐述测定微生物数量的常用方法。(科学思维) 3．运用稀释涂布平板法，进行细菌分离和计数操作。(科学探究) [对应学生用书P14] 一、选择培养基 1．概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 2．举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培育基的特点是以尿素为唯一氮源。 二、微生物的选择培养 1．方法：稀释涂布平板法。 2．过程 三、微生物的数量测定 1．稀释涂布平板法测定微生物数量 (1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)计数原则 ①一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。 ②在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 (3)统计结果 ①统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。 ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。 2．显微镜直接计数法测定微生物数量 (1)统计工具：特定的细菌计数板或血细胞计数板。 (2)统计方法：在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。 (3)统计结果 ①一般是活菌数和死菌数的总和。 ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目多。 四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．实验原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 2．方法步骤 ◆视野拓展 　分解尿素的细菌的进一步鉴定 (1)鉴定原理：细菌合成的脲酶将尿素分解成NH3，NH3会使培养基的碱性增强，pH升高。因此，可通过检测培养基pH的变化来判断该化学反应是否发生。 (2)鉴定方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果培养基pH升高，指示剂将变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。 ◆名师点睛 1．有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能在选择培养基上生长的微生物不一定都是所需的微生物，还需进一步验证。 2．当尿素为选择培养基的唯一氮源时，只有能产生脲酶的微生物才能将尿素分解为NH3供自身利用，其他微生物由于缺少氮源而无法生长繁殖。 3．进行土壤取样操作时，取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌处理。操作完成后，一定要洗手。 4．为排除非测试因素(培养基)的干扰，实验需设置不接种的全营养培养基进行空白对照。 5．利用显微镜直接计数本身不能区分细菌的死活，但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进行计数。 6．若实验使用的平板和试管较多，为了避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。 ◆思维启迪 1．对接种环和涂布器进行灼烧灭菌，在操作上有何区别？ 提示：接种环灭菌时，应将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红；涂布器灭菌时，应先将涂布器浸在酒精中，再放在火焰上灼烧，直到酒精燃尽。 2．为什么稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少？ 提示：因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 ◆概念检测(对的画“√”，错的画“×”) 1．选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物的生长。(　　√　　) 2．以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基。(　　√　　) 3．脲酶能催化尿素分解产生N2，N2可作为细菌生长的氮源。(　　×　　) 4．稀释涂布平板法能分离细菌，也能对样品中的细菌进行计数。(　　√　　) 5．测定不同微生物数量时，接种的土壤稀释液的稀释度相同。(　　×　　) 6．菌落特征是鉴别菌种的重要依据。(　　√　　) 7．利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量。(　　×　　) 备课札记 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 [对应学生用书P16] 任务一 选择培养基 有机农药苯磺隆是一种强效除草剂，长期使用会严重污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某种微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如下图甲、乙所示。 [问题探究] 1．该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一氮源的原因是