第3章 第2节 第2课时 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定（课件PPT）-【优化指导】2023-2024学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 单选版）

第3章　基因工程 第2节　基因工程的基本操作程序 第2课时　将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 栏目索引 自主落实·掌握必备知识 合作探究·提升关键能力 学以致用·发展核心素养 素养训练·学业质量评价 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 课时目标 1．通过实例，分析将目的基因导入受体细胞的方法及目的基因的检测与鉴定。(生命观念) 2．构建基因工程的基本操作流程。(科学思维) 3．基于DNA片段的扩增及电泳鉴定，尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。(科学探究) 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 一、将目的基因导入受体细胞 1．将目的基因导入植物细胞 (1)花粉管通道法 ①用__________将含目的基因的DNA溶液直接注入____中。 ②在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助__________进入胚囊。 微量注射器 子房 花粉管通道 自主落实·掌握必备知识 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 (2)农杆菌转化法 ①原理：农杆菌Ti质粒上的__________可整合到受体细胞的染色体DNA上。 ②适用范围：主要适用于__________和________。 2．将目的基因导入动物细胞 (1)方法：________技术。 (2)受体细胞：______。 双子叶植物 裸子植物 显微注射 受精卵 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 3．将目的基因导入微生物细胞 常以大肠杆菌作为受体细胞，一般先用____处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中__________的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。 二、目的基因的检测与鉴定 1．分子水平的检测 (1)通过______等技术检测受体细胞的____________上是否插入了目的基因。 (2)利用PCR技术检测目的基因是否转录出了________。 (3)用相应的抗体进行______________检测目的基因是否翻译成蛋白质等。 Ca2+ DNA分子 PCR 染色体DNA mRNA 抗原—抗体杂交 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 2．个体生物学水平的鉴定：抗虫、抗病接种实验等。 三、DNA片段的扩增及电泳鉴定 1．实验原理 (1)DNA片段的扩增 PCR利用了______________原理，通过调节____来控制DNA双链的__________。 (2)琼脂糖凝胶电泳 ①带电粒子：DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上______或______。 DNA的热变性 温度 解聚与结合 正电荷 负电荷 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 ②迁移动力与方向：在____的作用下，带电分子会向着与它所带电荷____的电极移动，这个过程就是电泳。 ③迁移速率：在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的____、DNA分子的____和____等有关。 ④检测：凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300 nm的______下被检测出来。 2．方法步骤 (1)移液：用__________按照配方或PCR试剂盒的说明书，在__________中依次加入各组分。 电场 相反 浓度 大小 构象 紫外灯 微量移液器 微量离心管 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 (2)离心：待所有的组分都加入后，盖严离心管的盖子。将微量离心管放入离心机里，离心约____s，使反应液集中在管的____。 (3)反应：将装有反应液的微量离心管放入________中，设置程序进行反应。 (4)配制琼脂糖溶液：根据待分离DNA片段的____，用__________配制琼脂糖溶液，一般配制质量分数为__________________的琼脂糖溶液。在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化。稍冷却后，加入适量的____染料混匀。 (5)制备琼脂糖凝胶：将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具，并插入合适大小的梳子，以形成______。待凝胶溶液完全凝固后，小心拔出梳子，取出凝胶放入电泳槽内。 10 底部 PCR仪 大小 电泳缓冲液 0.8%～1.2% 核酸 加样孔 返回导航 高中生物　选择性必修3　R (单选) 第3章　基因工程 (6)将__________加入电泳槽中，电泳缓冲液没过凝胶1 mm为宜。 (7)将扩增得到的PCR产物与______________(内含指示剂)混合，再用__________将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。 (8)接通电源，根据电泳槽阳极至阴极之间的距离来设定电压，一般为