内容正文:
第3章 基因工程
第2节 基因工程的基本操作程序
第1课时 目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建
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第3章 基因工程
课时目标 1.运用结构与功能观、物质与能量观,理解PCR技术的过程、原理及条件等内容。(生命观念)
2.运用文字与图示的方式,阐明目的基因的获取和基因表达载体的构建过程。(科学思维)
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第3章 基因工程
一、目的基因的筛选与获取
1.筛选合适的目的基因
(1)目的基因
①概念:在基因工程的设计和操作中,用于改变____________或获得预期________等的基因。
②作用:主要是指__________的基因。
(2)筛选目的基因的方法:从相关的__________________的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。
受体细胞性状
表达产物
编码蛋白质
已知结构和功能清晰
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第3章 基因工程
2.获取目的基因的方法:常用______特异性地快速扩增目的基因。
3.利用PCR获取和扩增目的基因
(1)概念:PCR是______________的缩写。它是一项在体外提供参与DNA复制的________与________,对目的基因的__________进行大量复制的技术。
(2)原理:________________。
PCR
聚合酶链式反应
各种组分
反应条件
核苷酸序列
DNA半保留复制
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第3章 基因工程
(3)过程
(4)鉴定:常采用______________来鉴定PCR的产物。
受热变性
引物
耐高温的DNA聚合酶
琼脂糖凝胶电泳
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第3章 基因工程
二、基因表达载体的构建
1.基因表达载体构建的目的
让目的基因在受体细胞中________,并且遗传给下一代;同时,使目的基因能够____和________。
2.基因表达载体的组成
稳定存在
表达
发挥作用
上游
RNA聚合酶
下游
转录
重组DNA分子
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第3章 基因工程
3.基因表达载体的构建过程
(1)首先用一定的______切割载体。
(2)然后用____限制酶或能产生________的限制酶切割含有目的基因的DNA片段。
(3)再利用____________将目的基因片段拼接到载体的切口处。
限制酶
同种
相同末端
DNA连接酶
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第3章 基因工程
◆漫画助学
基因表达载体的家族成员
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第3章 基因工程
◆思维启迪
1.细胞内DNA复制时是否需要引物?为什么?
提示:需要;因为DNA聚合酶不能从头开始合成DNA单链,只能将游离的脱氧核苷酸连接到一条DNA单链的3端,所以在延伸子链前,需要提前合成一小段RNA或DNA作为引物。
2.用PCR可以扩增mRNA吗?
提示:不能。PCR的原理是DNA半保留复制,只可用于扩增DNA。
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第3章 基因工程
◆概念检测(对的画“√”,错的画“×”)
1.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应。( )
2.PCR扩增技术中,需用解旋酶使双链DNA解聚。( )
3.PCR过程使用的DNA聚合酶的特点是耐高温。( )
4.PCR技术中,DNA模板链上碱基G和C的比例越高,DNA变性解聚为单链所需的温度就越高。( )
5.基因工程的基本操作程序的核心步骤是目的基因的获取。( )
6.基因表达载体中含有启动子和终止密码子。( )
×
×
√
√
×
×
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第3章 基因工程
任务一 目的基因的筛选与获取
利用PCR扩增目的基因的过程如下图所示。
合作探究·提升关键能力
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第3章 基因工程
[问题探究]
1.PCR技术中需要的两种引物碱基序列相同吗?为什么?
答案:不相同。由于DNA两条模板链中碱基序列并不相同,而引物需要分别与两条模板链进行碱基互补配对,因此DNA两条模板链在进行扩增时,需要的两种引物碱基序列是不相同的。
2.PCR技术中,子链的延伸方向是怎样的?
答案:从5端向3端延伸。
3.PCR扩增的是完整的模板DNA分子吗?
答案:不是,PCR扩增的仅仅是两种