1.2 微生物的基本培养技术的导学案-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修三

一 微生物的基本培养技术的学案 【学习目标】 (一)学习目标 1.阐明在发醇工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提 2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术 3.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。 【学习重难点】 (一)学习重难点 1. 微生物纯培养的基本操作要求 2.母菌的纯培养 【颓习新知】 (一)无菌技术 1.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术主要包括___和___。 2. 消毒 (1)概念:指使用较为 的物理、化学或 等方法杀死物体表面或内部 微生物。 、操作者的. (2)适用对象:操作的 和手等。 (3)常用方法:煮沸消毒、巴氏消毒等。 项目 主要方法 应用范围 62~65*C消毒30min或 消毒 牛奶、鸣酒、果酒和酱油等不 80~90C处理30s1 法 耐高温的液体 min 消表 100C煮沸56 min 家庭餐具等生活用品 消 法 过抽 30W紫外灯照射30min( 接种室、接种箱或超净工作台 毒 损伤细菌的DNA) 皮肤、伤口、动植物组织表面 化学药剂 用体积分数为70%~75% 消毒、空气、手术器械、塑粗 消毒 的 _、酒 或玻璃器m 3. 灭菌 (1)概念:指使用 的理化方法杀死物体内外。 的微生物.包括_和 用具和 (2)适用对象:用于微生物培养的 等。 (3)常用方法:湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等 项目 主要方法 应用范围 直接在酒精灯火焰的充 涂布器、接种环、接种针或其他金属 灭菌 分燃烧层灼烧 用具,试管口或瓶口等 干热灭菌箱中,160~ 耐高温的、需要保持干燥的物品,如 K掘 灭菌 170C的热空气中维 玻璃器I(如吸管、培养I等)、金属用 持2~3h 具等 高压蒸汽灭 菌(灭 100 kPa、121C维持 培养基等 15~30min 菌) 4. 消毒和灭菌的比较 项目 消毒 灭菌 作用强度 较为 的物理、化学因素 消灭微生物的数 物体表面或内部微生 物体内外的 微生物 量 物 能否消灭芽袍、袍 消灭__芽袍 子 能消灭__芽袍和袍子 操作空间、操作者的衣着和 适用对象 接种环、接种针、玻璃器I. 手等 培养基等 消毒法、巴氏消毒法 常用方法 化学药剂消毒法、紫外线消 毒法 5.无菌技术可用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外.还能有效避免操作者自身被 微生物感染。 【易错提示】 (一)易错提示 无菌操作中的注意事项 (1)用体积分数为70%的酒精消毒效果最好,原因是浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固形成一 层保护膜,酒精不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 (2)接种室、接种箱和超净工作台在使用前,可以用紫外线照射30min. 以杀死物体表面或空 气中的微生物。在照射前,适量喷酒石炭酸或煤酸溶液等消毒液,可以加强消毒效果。 (3)芽袍是某些细菌生长到一定阶段,在细胞内形成的休眠体。袍子是某些微生物的繁殖体。 (4)一般情况下,在实验操作过程中,对能灭菌的对象进行灭菌处理,如培养I及用到的各种 器具:对无法灭菌的对象则进行消毒处理,如实验操作者的衣着和双手等。 (5)与煮沸消毒法相比,巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少。 (6)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还能有效避免污染环境 以及操作者自身被微生物感染。 有关培养基营养物质的三点提 (1)培养不同的微生物所需要的营养物质可能不同。 ①自养型微生物的培养基主要以无机营养为主。 ②异养型微生物的培养基主要以有机营养为主。 (2)微生物需要补充生长因子,是由于缺乏合成这些物质所需要的晦或合成能力有限 (3)微生物需要量最大的是碳源。能合成含碳有机物的是自养型,反之则为异养型。 【深化探究】 (一)深化探究 1.(科学探究)请结合倒平板的操作程序探究: 图一 图二 (1)如图一所示,为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰? (2)如图二所示,从防止杂菌污染的角度思考,为什么培养基冷却凝固后将平板倒置? (3)怎样判断培养基制备是否合格、成功,是否受到污染? (1)提示:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 (2)提示:培养基冷却凝固后.I盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将 平板倒置,既可以避免培养基中的水分过快地蒸发,又可以防止I盖上的水珠落入培养基造成 污染。 (3)提示:将未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后,如果无菌落生长,说明培养基制备 成功、合格,未受到污染。 2.(科学思维)请结合平板划线法探究 (1)平板划线操作时,需要对接种环灼烧灭菌,比较下列灼烧灭菌的目的 项目 目的 薛取菌液前灼烧 每次划线前灼烧 划线结束后灼烧 (2)在做第二次划线以及其后的操作时,为什么总是丛上一次