1.2 微生物的选择培养与计数的导学案-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修三

二微生物的选择培养与计数的学案 【学习目标】 (一)学习目标 1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 2概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。 3讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。 【学习重难点】 (一)学习重难点 【教学重点】 1微生物纯培养的基本操作要求，微生物选择培养的原理。 2酵母菌的纯培养。 3.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【教学难点】 1酵母菌的纯培养。 2.土壞中分解尿素的细菌的分离和计数。 【预习新知】 (一)选择培养基 1.自然界中目的菌的筛选：从目的菌株生存的 中找。 (I)实例：聚合酶链式反应PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，是从热泉中筛选出来的_ 中提取出来的。 (2)依据：水生栖热菌能在 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不 能生存。 2.选择培养基：允许 的微生物生长，同时 其他种类微生物生长的培 养基。 3实验室中目的菌的筛选 (1)原理：人为提供有利于 生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时 其他 微生物的生长。 (2)方法：利用 培养基分离。 【易错提示】 (一)易错提示 稀释涂布平板法的注意事项 (1)稀释操作时：每支试管及其中的9L水、移液管等均需灭菌：操作时，试管口和移液管应 在离火焰1~2cm处。 (2)涂布平板时 ①涂布器浸在体积分数为70%的酒精中，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将蘸有少量 酒精的涂布器在火焰上引燃。 ②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。 ③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体。 实验中的两种“对照组”与“重复组” (1)两种对照组作用比较。 ①判断培养基中“是否有杂菌污染”，需将未接种的培养基（空白对照组）同时进行培养。 ②判断选择培养基“是否具有筛选作用”，需设置完全培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）进行接种培 养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论 (2)重复组的设置及作用：为排除偶然因素对实验结果的干扰，在每一稀释度下宜设置3个平板作 为重复组，选择菌落数均在30一300且数目相差不大的三个平板，用“平均值”代入计数公式计 算活菌数。 稀释涂布平板法分离微生物常见误区 (1)误认为不用涂布均匀：用涂布器涂布平板时一定要涂布均匀，否则难以得到单菌落。 (2)误认为不用冷却：涂布器使用前应进行酒精浸泡，然后灼烧灭菌，冷却之后再涂布，否则会由于 温度过高杀死菌种。 【深化探究】 (一)深化探究 【任务驱动一】选择培养基 1.目的：从众多的微生物中分离所需要的微生物。 2.三种筛选方法的特点及举例 方法 特点 举例 利用只含有尿素一种氮源的 利用微生物的营养特点 通过控制培养基的营养成分，使某种 培养基，可筛选出分解尿素的 进行选择培养 微生物能生长，其他微生物不能生长 细菌 在完全培养基中加入某些化学物 利用某种化学物质进行 质，利用加入的化学物质对微生物产 加入青霉素可以分离出酵母 的选择培养 生的影响，抑制某些微生物，同时选 菌和霉菌 择所需的微生物 利用培养条件进行的选 将培养基放在高温环境中培 改变微生物的培养条件 择培养 养可以得到耐高温的微生物 【合作探究：】 (1)如何从大豆田土壤中分离出固氮微生物？ (2)要分离出分解纤维素的微生物，应在什么样的环境中取土样？应配制什么样的培养基？ (3)根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌？ 【任务驱动二】微生物计数的方法 微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标法等方法，但是一般使用计数法，计数法可 分为直接计数法和间接计数法。二者的比较如下表所示： 项目 直接计数法 间接计数法 当样品的稀释度足够高时，培养基表 利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在 面生长的一个菌落，来源于样品稀释 原理 显微镜下计算一定容积的样品中微生物的 液中的一个活菌。通过统计平板上的 数量 菌落数，就能推测出样品中大约含有 多少活菌 主要用 显微镜、细菌计数板 培养基 具 计数数 菌体本身 培养基上菌落数 据 优点 计数方便、操作简单 计数的是活菌 缺点 死菌、活菌都计算在内 操作较复杂，有一定误差 计算公 每毫升原液含菌数=每小格平均菌体数× 每毫升原液含菌数=培养基上平均菌 式 400×10000×稀释倍数 落数×稀释倍数÷涂布液体积 【合作探究：】 1在用稀释涂布平板法对微生物进行计数时，统计菌落数目的理论依据是什么？ 2.在稀释涂布平板法中，为何需要涂布3个平板？ 3.为什么一般选择菌落数为30~300的平板进行计数？ 4.为什么要选取菌落数目稳定时的记录作为结果？ 5.稀释涂布平板法和显微计数法对微生物计数产生的实验误差如何？试分析原因。 【巩固训练】 (一)巩固训练 1.某兴趣小组的同学