内容正文:
第3章 基因的本质
第3节 DNA的复制
遗传与进化
1、沃森和克里克提出了遗传物质自我复制的假说:
(1)DNA复制,DNA双螺旋 ,互补的碱基之间的 断裂。
(2)解开的两条单链分别作为复制的 ,游离的脱氧核苷酸根据
原则,通过形成 ,结合到作为模板的单链上。
(3)新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,因此,
这种复制方式称作 。
解开
氢键
模板
碱基互补配对
半保留复制
特点:
子代DNA双链一半是新的,一半是旧的
对DNA复制的推测——提出假说
氢键
2.其他观点——全保留复制、分散复制
全保留复制
分散复制
特点:一全旧,一全新
特点:新旧都有,片段组合
以亲代DNA双链为模板合成两条DNA子链,子代DNA中母链重新结合形成一个DNA,两条新合成的子链彼此结合成一个DNA分子
亲代DNA双链被切成片段后合成,然后子、母双链聚集成“杂种链”
对DNA复制的推测——提出假说
磷酸
思考1.要通过实验“探究DNA复制是哪种方式?”关键思路是什么?
通过实验区分亲代和子代的DNA
设法观察亲代DNA链在子代DNA中如何分布
思考2.DNA是肉眼看不可见的,如何在实验中直观区分母链和子链?
同位素标记技术(同位素示踪技术)
磷酸
思考3.根据同位素的何种差异来进行实验观察区分呢?可以是放射性的有无吗?
不能
同位素的相对原子质量的不同
背景知识:
15N和14N是N元素的两种稳定的同位素,这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大。
磷酸
思考4.形成的不同密度的DNA分子应如何区分?
密度梯度离心
背景知识:
高密度介质氯化铯(CsCl)经过高速离心后, CsCl会形成一个密度梯度,离心管底部最大,顶部最小。当加入DNA分子后,经过离心DNA会停留在与周围的氯化铯密度相同的位置;通过观察DNA在CsCl梯度中的位置就能区分含15N的DNA和含14N的DNA。
高密度带
中密度带
低密度带
15N
14N
15N
15N
14N
14N
密度梯度离心技术
利用离心技术可以在试管中区分含有不同质量N元素的DNA。
思考5.差速离心法和密度梯度离心法的原理是否一致?
差速离心法:根据颗粒大小和密度的不同存在的沉降速度差别,分级增加离心速率,从试样中依次分离出不同组分的方法。
密度梯度离心法:在密度梯度介质中进行的依密度而分离的离心法。各组分会依其密度分布在与其自身密度相同的液层中。
氯化铯-CsCl
DNA半保留复制的实验证据
实验者:
实验材料:
实验方法:
美国生物学家梅塞尔森和斯塔尔
大肠杆菌
同位素标记技术、密度梯度离心技术
1.科学家采用大肠杆菌作为实验材料,有何优点?
让亲代DNA的每一条链(母链)被15N标记
14NH4Cl为DNA子链合成提供原料,让新合成的子链DNA获得14N标记
繁殖速度快
阅读课本P54“证明DNA半保留复制实验”的实验过程,思考下列问题:
2.用含有15NH4Cl的培养液培养大肠杆菌,让其繁殖若干代,目的是什么?
3.将上述大肠杆菌转移到含14NH4Cl的培养液中,目的是什么?
证明DNA半保留复制的实验
4.如何将含有不同N元素的子代DNA分开呢?
密度梯度离心
10
证明DNA半保留复制的实验
实验过程:
①
让亲代DNA的每一条链(母链)被15N标记
②
14NH4Cl为DNA子链合成提供原料,让新合成的子链DNA被14N标记
③
④
密度梯度离心
密度梯度离心
证明DNA半保留复制的实验
演绎推理(预期实验结果):
讨论1:
请运用演绎推理来分析实验过程, 完成上述实验预期,填写图中的方框。
证明DNA半保留复制的实验
演绎推理(预期实验结果):
15N/14N-DNA
14N/14N-DNA
重带
1/2中带
中带
1/2轻带
15N/14N—DNA
15N/15N—DNA
证明DNA半保留复制的实验
演绎推理(预期实验结果):
如果DNA复制是全保留复制
讨论2:
假如全保留复制是正确的,实验预期又会是怎样的(子一代、子二代的DNA双链分别含有哪种N元素?离心后出现的密度带?)?
证明DNA半保留复制的实验
演绎推理(预期实验结果):
如果DNA复制是全保留复制
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
15N/15N—DNA
1/2轻带
1/2重带
3/4轻带
1/4重带
14N/14N-DNA
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
15N/15N-DNA
重带
证明DNA半保留复制的实验
演绎推理(预期实验结果):
如果DNA复制是分散复制