内容正文:
课前提问
酵母菌的纯培养
2.接种和分离酵母菌
1.制备培养基
3.培养酵母菌
①配制培养基( 、葡萄糖、 、水)
②灭菌
③倒平板(在 附近操作)
培养基: 灭菌( 锅)
培养皿: 灭菌( 锅)
用接种环在固体培养基上用 接种
平板 ,放入28℃左右的恒温培养箱培养
琼脂
湿热
高压蒸汽灭菌
干热
干热灭菌
酒精灯火焰
平板划线法
倒置
马铃薯
二 微生物的选择培养和计数
第一章 第2节
第一章 发酵工程
本节聚焦
怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理?
如何通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物?
测定微生物数量地常用方法有哪些?
(2课时)
资料:1973年,科学家在美国黄石国家公园的热泉中筛选出耐热的水生栖热菌,并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应(PCR)。
讨论:
1.为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢?
2.你得到什么启示?(当我们也要筛选一种特定的微生物时)
寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
3.这对在实验室中选择培养(筛选)特定的微生物有什么启示?
问题探讨
(P16)
(P16)
耐寒微生物
耐热微生物
石油分解菌
寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找!
温泉
冰川
油田
一、选择培养基
在微生物学中,将 的微生物生长,同时
微生物生长的培养基,称为选择培养基。
真菌
固氮微生物
④石油作为唯一碳源的培养基能分离出:
能分解石油的微生物
③异养型微生物不能制造有机物,不加含碳有机物的培养基能分离出:
②不加氮源的培养基能分离出:
①加入青霉素(能杀死细菌、放线菌)的培养基能分离出:
允许特定种类
抑制或阻止其他种类
举例
自养型微生物
思考▪讨论
选择培养基配方的设计
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。这些细菌之所以能分解尿素,是因为能合成脲酶,来催化尿素分解。
讨论1:如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
用尿素作为唯一氮源的选择培养基
CO(NH2)2 + H2O 2NH3 + CO2
脲酶
讨论2:该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
讨论3:仅通过选择培养基可以知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌吗?
不可以
该培养基用尿素作为唯一氮源,其他成分基本相同。
二、微生物的选择培养
任务:阅读P17-18,回答问题:
1.想知道1g土壤中有多少分解尿素的细菌,仅有 是不够的,还需要 以及 的方法。
选择培养基
对土样进行适当的处理
科学的测定微生物数量
2.对土样进行怎样的处理?
由于土壤中细菌的数量庞大,要对土壤进行充分稀释,然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上。
稀释涂布平板法
3.稀释涂布平板法的操作过程:
①如何进行系列梯度稀释? ②如何涂布平板?
4.如何培养?
5.你认为实验过程有什么要注意的事项?
稀释涂布平板法的操作过程:
1.铲取土壤,将样品装入纸袋中。
2.将10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。
1mL
1ⅹ107
1ⅹ105
1ⅹ106
1ⅹ103
1ⅹ102
1ⅹ104
1mL
1mL
1mL
1mL
9mL无菌水
1mL
1mL
90mL无菌水
①系列梯度稀释
10g
稀释10倍
取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的是试管中,依次等比稀释。
依次稀释10倍
3.取0.1mL菌液, 加到培养基表面。
4.将涂布器 在盛有酒精的烧杯中。
5.将涂布器放在火焰上 ,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布。
6.用涂布器将菌液均匀地 在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。
稀释涂布平板法的操作过程:
②涂布平板
滴
浸
涂布
灼烧
待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入30-37℃的温度下培养1-2d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。
培养:
分析:需要设置对照组吗?
按照以下的