内容正文:
第1章 第2节 微生物的培养技术及应用(第一课时)
【学习目标】
概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求,进行酵母菌的纯培养。
知识点一 培养基的配制
【自主学习】
1.培养基
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2.培养基的用途:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3.培养基的种类
4.培养基的配方
(1)各种培养基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等营养物质。如下表为某微生物培养基的成分:
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
H2O
1.4 g
2.1 g
0.2 g
10.0 g
1.0 g
15.0 g
定容至
1 000 mL
该培养基中可以为微生物提供氮源的是尿素,可以为微生物提供碳源的是葡萄糖。此培养基中加入了琼脂,为固体培养基。
(2)还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
微生物
乳酸杆菌
霉菌
细菌
厌氧微生物
特殊
需求
添加
维生素
pH调
至酸性
pH调至中
性或弱碱性
提供无
氧环境
【重点突破】
材料
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
琼脂
水
用量
5 g
10 g
5 g
20 g
定容至1 000 mL
上表是某培养基的配方,分析回答:
1.根据培养基的物理性质,该培养基属于______培养基,理由是____________________________。
固体 该培养基的配方中含有凝固剂琼脂
2.该培养基培养的微生物同化作用类型是____________,理由是_________________________________。
异养型 该微生物的碳源和氮源是有机物
3.该培养基中主要提供碳源和氮源的物质分别是什么?属于有机物还是无机物?
牛肉膏主要提供碳源,蛋白胨主要提供氮源。二者均属于有机物。
4.在科研和生产上,研究和应用微生物的前提是什么?在实验室中培养微生物应注意哪些问题?
在科研和生产上,研究和应用微生物的前提是防止杂菌污染,获得纯净的微生物。在实验室中培养微生物,一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件,另一方面要确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。
知识点二 无菌技术
【自主学习】
1.获得纯净的微生物培养物的关键:防止杂菌污染。
2.消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
概念
使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物
使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
常用
方法
煮沸消毒法、巴氏消毒法、酒精消毒法、紫外线消毒法
湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌
适用
对象
操作的空间、操作者的衣着和双手等
接种用具(接种环、接种针)、玻璃器皿、培养基等
3.注意事项
(1)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
(2)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
【重点突破】
1.一些需要保持生物活性的物体(如实验者的双手)应该使用何种无菌技术?为什么?
应使用消毒的方法,因为用灭菌的方法会杀死或破坏人的皮肤组织细胞。
2.对于一些没有生物活性的物体如培养基、接种环、培养皿等要使用何种无菌技术?
应使用灭菌的方法,其中培养基一般采用高压蒸汽灭菌,接种环使用灼烧灭菌,培养皿等玻璃器皿使用干热灭菌。
3.用于生物消毒的微生物具有什么特点?
用于生物消毒的微生物能产生杀死其他微生物的代谢产物或是寄生性的微生物。
4.牢固树立“无菌”意识,实验中严格执行无菌技术。无菌技术的目的是什么?
防止实验室的培养物被其他微生物污染,避免操作者自身被微生物感染。
5.通过学习无菌技术,关注生活中的现象和人类健康。
(1)“无菌操作”与人们的生活休戚相关,无时无处不在。在日常生活、生产实践、自身健康防护中,分别有哪些“无菌操作”的例子?
在日常生活、生产实践、自身健康防护中“无菌操作”的例子分别有:①被褥、鞋袜要常晒;肉制品储存时用盐腌等。②家畜阉割后,要在其伤口处涂抹一些酒精或白酒;初冬杨树树干涂刷生石灰水等。③打针时,注射部位要用酒精棉球擦拭;在皮肤伤口处涂抹一些碘酒。
(2)注射药液前,常用酒精擦拭注射部位,这是消毒还是灭菌?体积分数为70%和95%的酒精,哪种效果更好?为什么?
酒精擦拭属于消毒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果更好。浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜,酒精分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌能力减弱。
知识点三 微生物的纯培养
【自主学习】
1.纯培养
在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的