内容正文:
第2节 动物细胞工程
第二章 细胞工程
2
首例胚胎移植成功
首创动物组织体外培养法
发现哺乳动物精子获能现象
体细胞核移植成功
试管家兔诞生
创立单克隆抗体技术
胚胎分割移植成功
分离和培养小鼠胚胎干细胞
克隆羊多莉诞生
获得诱导多能干细胞
单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生
我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。
1890年
1907年
1951年
1958年
1959年
1975年
1978年
1981年
1996年
2006年
2014年
2017年
P33
动物细胞工程(含胚胎工程)的发展历程
科技探索之路
3
人造皮肤 自体皮肤移植
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合
动物细胞工程的基础
动物细胞工程技术
动物细胞工程
第1课时 动物细胞培养
操作原因:
原理:
细胞增殖
思考: 幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?
彼此限制了生长和增殖将组织块分散成单个细胞后,细胞所需的营养容易供应,其代谢废物容易排出。
幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养。原因是这些细胞分裂能力强。
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
1. 动物细胞培养的概念
动物细胞培养
一
组织
细胞生长和增殖
适宜条件
动物体
取出
单个细胞
分散
目的:
获得细胞或者细胞产物。
不能
获得完整动物个体.
1. 动物细胞培养的概念
动物细胞培养
一
包括哪些条件?
2. 动物细胞培养的条件
糖类、
氨基酸、
无机盐、
维生素 ……
适宜的温度、pH、渗透压
无菌、无毒的环境
适宜的气体环境
动物细胞培养
一
2. 动物细胞培养的条件
(1)营养
+
由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,在使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分。
③培养基类型:
液体培养基(培养液)
①合成培养基:将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成
②血清:
营养物质主要包括:糖类、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子等
不能是淀粉,动物细胞不能直接利用
合成培养基
血清
知识延伸
血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中,蛋白质主要为白蛋白和球蛋白;氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本原料,且有些氨基酸是动物细胞本身不能合成的(称为必需氨基酸),必须由培养液提供;激素有胰岛素、生长激素等。血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质,它们能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此,在培养动物细胞时,为保证细胞能够顺利生长和增殖,一般需在培养基中添加10%~20%的血清等天然成分。
动物细胞培养通常要添加血清的原因
(2)无菌、无毒的环境
2. 动物细胞培养的条件
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。
②在无菌环境下进行操作。
③培养液需要定期更换。
原因:以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
(可根据实际情况适量添加抗生素。)
无菌
无毒
补充:添加抗生素
(3)温度、pH和渗透压
2. 动物细胞培养的条件
①适宜的温度:哺乳动物多以__________ ℃为宜
②适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为_________
③适宜的渗透压:维持细胞正常的形态和功能
36.5±0.5
7.2~7.4
(4)气体环境
①O2作用:_________________
②CO2的主要作用:_________________
细胞代谢所必需的
维持培养液的pH
通常用培养皿或松盖培养瓶,置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养
补充:添加抗生素
阅读课本44-45页 ,思考以下问题:
1.请简述动物细胞培养的过程。
2.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢?可用什么方法?
3.体外培养的动物细胞有哪些类型?
4.什么是原代培养和传代培养?
5.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?
6.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?
7.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同之处与不同之处?
动物细胞培养
一
3. 动物细胞培养的过程
我们将按照这六道题的思路来学习动物细胞培养的过程。这些问题中涉及到一些生物专有名词,大家在寻找答案的同时尝试初步理解。
3. 动物细胞培养的过程
取动物组织
分散成单个细胞
制成细胞悬液
原代培养(10代以内)
传代培养(10-50代)
3. 动物细胞培养的过程
取动物组织
分散成单个细胞
制成细胞悬液
原代培养(10代以内)
传代培养(10-50代)
动物胚胎或幼龄动物的组织。
用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理
思考:进行