1.2.1 微生物的基本培养技术-2023-2024学年高二生物同步优选备课一点通（人教版2019选择性必修3）

从社会中来 向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶。一般家庭自制酸奶可能会导致肠胃不适，主要原因是有杂菌混入。 那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？ 应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。 这需要应用无菌技术和微生物的培养技术。 微生物概述 1.概念： 难以用肉眼观察的微小生物的统称。 原核生物 (细菌、蓝细菌等) 原生生物 (如草履虫、衣藻等) 真菌 (如酵母菌、霉菌等) 病毒 新冠病毒 细菌 草履虫 酵母菌 2.种类： 3.研究和应用微生物的前提（也是发酵工程的重要基础）： 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物 4.实验室培养微生物的条件： ①要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件； ②要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。 微生物概述 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，即培养基。 一、培养基的配制 2.作用： 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3.类型： 固体 培养基 液体 培养基 有 无 琼脂 分离、 计数、 鉴定等 扩大培养、 工业生产 长有酵母菌菌落 盛有液体培养基 1.概念： 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质 化学成分 用途 不加凝固剂 加凝固剂，如琼脂 工业生产 观察微生物的运动、 分类鉴定 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 用已知的化学物质配制 分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物 在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 鉴别不同种类微生物 选择培养基 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 天然培养基 合成培养基 鉴别培养基 培养基的类型及用途 培养基中加氨苄青霉素 具有抗氨苄青霉素能力的菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌 选择培养基 培养基+氨苄青霉素 培养基 没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? 4.培养基的营养构成： ⑴基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐。 ①碳源： 无机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 有机碳源： 葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等 （自养微生物的碳源） （异养微生物的碳源） ②氮源： 无机氮源： NH4＋、NO3-、NH3等 有机氮源： 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。 ③无机盐： Ca、K 、Mg为大量元素 Zn、Cu、Mn、Mo等微量元素 凡是能够为微生物提供C、N等元素的营养物质。 一、培养基的配制 特殊营养物质： 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等 （天然物质牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有） ⑵还需满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的需求。 ①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素； ②培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性； ③培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性； ④培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。 一、培养基的配制 牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。 ①培养自养型微生物，通常需要提供无机碳源，如CO2、NaHCO3等； 而培养异养型微生物，则需要提供有机碳源，如糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等。 ②如果培养基里没有有机碳源，则通常培养的是自养型微生物；若含有有机碳源，则通常的为异养型微生物。 ③微生物需要量最大的是碳源，最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖； 最常用的无机氮源是铵盐和硝酸盐。 ④对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。⑤某些微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成生长因子所需要的酶或合成能力有限。 ⑥琼脂在培养基中仅作为凝固剂，不能为微生物提供能量和营养。 培养基的配制小结 10 二、无菌技术 1.获得纯净的微生物培养物的关键： 防止杂菌污染 2.无菌技术手段： 主要包括消毒和灭菌。 ⑴对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 ⑵将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 思考：无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？ 还能有效避免操作者被微生物感染。 11 3.消毒 ⑴概念：指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 ⑵常用的消毒方法 ①煮沸消毒法：100℃煮沸5～6min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。 ②巴氏消毒法：62～65℃下消毒30 min或80～