内容正文:
基因工程的基本工具和基本操作程序
基础检测
1.关于如图所示黏性末端的说法,正确的是( )
A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的
B.乙中的酶切位点在A与G之间
C.如果甲中的G突变为A,则该限制酶不能识别图甲所示的序列
D.构建基因表达载体所用的限制酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处
2.如图表示基因工程中目的基因的获取示意图,不正确的是( )
A.③表示PCR技术,用来扩增目的基因
B.某生物的不同器官和组织构建的cDNA文库不同
C.利用限制酶从基因组文库中获取目的基因
D.若基因比较小,序列又已知,则可以直接通过化学方法合成
3.某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具,将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接,以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是( )
A.质粒和目的基因都用酶3切割,用E. coli DNA连接酶连接
B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割,用T4 DNA连接酶连接
C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4 DNA连接酶连接
D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割,用E. coli DNA连接酶连接
4.下列关于目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定的叙述,错误的是( )
A.农杆菌转化法或用微量注射器将含目的基因的DNA溶液注入子房中可获得种子,再经过筛选和鉴定获得稳定遗传的转基因植物
B.如果受体细胞是大肠杆菌,常用Ca2+处理大肠杆菌使其处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,再将含目的基因的DNA溶液加入培养基中
C.利用显微注射将目的基因注入动物的受精卵中,这个受精卵可发育成为具有新性状的动物
D.可通过PCR技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因及目的基因是否表达
5.如图表示一项重要生物技术的关键步骤,X是获得了外源基因并能够将其表达的细胞。下列有关叙述,错误的是( )
A.X是含有人胰岛素原基因并能合成人胰岛素原的细菌细胞
B.质粒是细胞核或拟核外能进行自主复制的小型环状DNA
C.日的基因与质粒的结合体现的变异类型是基因突变
D.该技术又叫基因拼接技术,能定向改变生物性状
· 知识巩固
6.用限制性内切核酸酶EcoRⅠ、NotⅠ单独或联合剪切同一个DNA分子,获得的DNA片段电泳结果如图所示,最左边为DNA Marker(lkb=l000碱基对)。下列叙述错误的是( )
A.该DNA分子的大小为10kb
B.该DNA分子上至少有3个酶切位点
C.NotⅠ单独剪切后的产物与该DNA分子电泳时的迁移速率不相同
D.可以确定该DNA分子上EcoRⅠ、NotⅠ切割位点的相对位置
7.基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。如图为含有某目的基因的DNA片段、质粒土的酶切位点及限制酶识别切割位点,则据图分析,下列叙述正确的是( )
A.质粒作为基因工程运载体,只需具备启动子、终止子、标记基因、复制原点即可
B.不能用BclⅠ和BglⅡ切割质粒和含有目的基因的DNA片段,因为二者黏性末端相同
C.限制酶切割部位与DNA连接酶作用的部位不完全相同
D.构建基因表达载体时,目的基因必须接在启动子和终止子之间,以确保转录的正常进行
8.研究者从某微生物提取出抗旱基因,将其与载体DNA重组,再借助农杆菌导入玉米中增加玉米的抗旱性,如图表示该转基因玉米的培育过程,其中字母a、b表示具体的结构,数字①~④表示具体的过程,下列叙述正确的是( )
A.从微生物细胞中获取的基因需要加工后才能作为目的基因导入玉米细胞中
B.基因表达载体构建的过程需要DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶
C.图中b是愈伤组织,③与④过程中所需植物激素的含量、比例相同
D.用抗原—抗体杂交的方法检测没有杂交带出现,说明目的基因导入不成功
9.利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂,用于降解某种农药的残留,基本流程如图。下列叙述正确的是( )
A.过程①的反应体系中需要加入逆转录酶和核糖核苷酸
B.过程②需使用限制酶和DNA聚合酶,是基因工程的核心步骤
C.过程③将重组表达载体导入大肠杆菌后,大肠杆菌即可降解农药残留
D.过程④可利用PCR技术鉴定CarE基因是否成功导入受体细胞
10.如图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切核酸酶。下列有关说法中正确的是( )
A.图示过程是基因工程的核心步骤,所需的限制性内切核酸酶均来自原核生物
B.