2.2.1 动物细胞培养（课件）-【帮课堂】2023-2024学年高二生物同步学与练（人教版2019选择性必修3）

第2章 细胞工程 2.2 动物细胞工程 第1课时 ——动物细胞培养 培养皿 培养瓶 常用的技术：动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等， 其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 人造皮肤 人造皮肤：人体再生术的秘密 首创动物组织体外培养法 体细胞核移植成功 创立单克隆抗体技术 分离和培养小鼠胚胎干细胞 获得诱导多能干细胞 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴 1890年 1907年 1951年 1958年 1959年 1975年 1978年 1981年 1996年 2006年 2014年 2017年 首例胚胎移植成功 发现哺乳动物精子获能现象 试管家兔诞生 胚胎分割移植成功 克隆羊多莉诞生 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 动物细胞工程的发展历程 1 2 阐明动物细胞培养的条件和过程 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值 学习目标 目 生物学 高中 动物细胞培养 5 1.概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 2.原理： 细胞增殖 动物体 组织 单个细胞 细胞生长和增殖 取出 分散 适宜条件 （增殖方式：有丝分裂） 3.地位： 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 一、动物细胞培养的条件 培养基的构成： 一般使用液体培养基，也称为培养液 + 合成培养基 血清等天然成分 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、 无机盐、维生素 … … 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基 含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质。 一、动物细胞培养的条件 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 ①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜； ②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________ ； ③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。 定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 ①培养液、培养用具：灭菌处理； ②在无菌环境下进行操作； 一、动物细胞培养的条件 95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、 无机盐、维生素 … … CO2培养箱 维持培养液的pH 5%CO2 O2：细胞代谢所必需 培养皿 松盖培养瓶 培养容器： 二、动物细胞培养的过程 自主探究 仔细阅读教材P44-45文字及动物细胞培养过程示意图，完成以下问题，时间3分钟。 1.为何动物细胞培养过程将组织分散成 单个细胞呢？可用什么方法？ 2.体外培养动物细胞有哪些类型？ 3.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？ 4.什么是原代培养和传代培养？ 5.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？ 6.贴壁生长的细胞，培养过程中两次用 胰蛋白酶处理的对象分别是什么？ 二、动物细胞培养的过程 小组合作 1.为何动物细胞培养过程将组织分散成 单个细胞呢？可用什么方法？ 2.体外培养动物细胞有哪些类型？ 3.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？ 4.什么是原代培养和传代培养？ 5.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？ 6.贴壁生长的细胞，培养过程中两次用 胰蛋白酶处理的对象分别是什么？ 仔细阅读教材P44-45文字及动物细胞培养过程示意图，完成以下问题，时间5分钟。（重点讨论3、4、5、6题。） 二、动物细胞培养的过程 悬浮培养的细胞:直接用离心法收集 贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集 取动物组织 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分散成单个细胞 解决 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等 接触抑制 传代培养 制成细胞悬液 原代培养 分瓶 培养 加培养液 初次在培养皿或培养瓶内 细胞分裂受阻 ② 制成细胞悬液，分瓶培养 ① 收集细胞 二、动物细胞培养的过程 1．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？为什么？ 蛋白质。 不可以用胃蛋白酶。 多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶(适宜pH为1.5左右)在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适用于细胞培养时的处理。 二、动物细胞培养的过程 2．“细胞增殖到互相接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止分裂繁殖，出现接触抑制的现象”。试结合上述解释，举例说明哪种细胞无接触抑制现象，并阐述原因。 癌细胞；癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少 单层细胞 多层细胞 二