内容正文:
第3章 基因工程工程
第2节 基因工程的基本操作程序
(第一课时)
目标
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针对人类生产和生活的某一需求,尝试提出初步的基因工程构想,完成初步设计。
(科学探究)
结合实例,采用文字和图示方式说明基因工程的基本操作程序。(科学思维)
运用结构与功能观等观念理解PCR技术的过程、原理、条件等(生命观念)
学习目标
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情境视频一:从社会中来
1997年,我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年,我
国已育成转基因抗虫棉新品种100多
个,减少农药用量40万吨,增收节
支社会经济效益450亿元。
问题1:你知道转基因抗虫棉抗虫的机制是什么吗?培育转基因抗虫棉一般需要哪些步骤呢?
中国抗虫棉纪实(视频)
转基因抗虫棉
普通棉花
培育转基因抗虫棉的简要过程
普通棉花
(无抗虫特性)
棉花细胞
抗虫棉
提取
表达Bt基因
导入
与载体拼接
重组DNA分子
1.目的基因的筛选与获取
2.基因表达载体的构建
(核心)
3.将目的基因导入受体细胞
4.目的基因的检测与鉴定
Bt基因
苏云金杆菌
情境视频一:从社会中来
目录
CONTENTS
第二步:基因表达载体的构建
2/
第一步:目的基因的筛选与获取
1/
第三步:将目的基因导入受体细胞
3/
第四步:目的基因的检测与鉴定
4/
DNA 片段的扩增及电泳鉴定
5/
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第一步:目的基因的筛选与获取
什么是目的基因,请举例;如何筛选目的基因呢?
为什么培育转基因抗虫棉用到的目的基因是Bt基因?
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合作探究一:请同学们自主阅读教材P76-77,小组合作思考讨论完成问题。
Bt基因的杀虫机理是怎样的?
抗虫棉中的Bt抗虫蛋白会不会对人畜产生危害?为什么?
一、目的基因的筛选与获取
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一、目的基因的筛选与获取
(一)目的基因:
概念
在基因工程的设计和操作中,用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。
实例
与生物抗逆性、优良品质、生产药物、毒物降解和工业用酶等相关的基因。
主要指的是编码蛋白质的基因
资料:苏云金杆菌通过产生苏云金杆菌伴胞晶体蛋白(Bt 抗虫蛋白),破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫。科学家将“杀虫基因”转入棉花中,棉花产生Bt抗虫蛋白抵抗虫害。
目的基因--Bt抗虫蛋白基因
问题2:那么,如何筛选目的基因呢?
筛选方法
从相关的
已知结构
和功能清晰
的基因中进行筛选
已知结构
科学家掌握了Bt基因的序列信息。
功能清晰
Bt抗虫蛋白只在某类昆虫肠道的碱性环境中才表现出毒性,对人和牲畜无影响。
一、目的基因的筛选与获取
(二)筛选合适目的基因:
实例:苏云金杆菌——Bt基因
筛选Bt基因作为培育转基因抗虫棉的目的基因。
测序技术
序列数据库
序列比对工具
利用测序技术、序列数据库(如GenBank)、序列对比工具(如BLAST)等,找到合适的目的基因
一、目的基因的筛选与获取
(二)筛选合适目的基因:
DNA测序仪
核苷酸序列比对
氨基酸序列比对
美国国家生物信息中心
测定核酸和蛋白质序列
以碱基顺序或氨基酸残基顺序为基本内容的分子生物信息数据库
把感兴趣的序列跟已经存在的序列数据库进行比较的工具。通过比对识别相关的序列,从而能获得目的基因和蛋白质的功能。
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先对目的基因进行扩增
一、目的基因的筛选与获取
问题3:获取一个Bt基因之后,是否就该立即开始准备转基因操作?
抗虫基因
快速获得大量抗虫基因
苏云金杆菌
提取
总结出PCR的概念、提出者、原理、目的、优点。
结合体内DNA复制过程,思考PCR的进行需要哪些条件?所需设备是什么?
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构建出PCR的大致过程;PCR扩增为什么需要引物?
如何对产物进行鉴定?PCR技术与DNA复制过程有哪些异同?
合作探究二:请同学们自主阅读教材P76-77,小组合作思考讨论完成问题。
一、目的基因的筛选与获取
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PCR由穆里斯等人于1985年发明,为此,穆里斯于1993年获得诺贝尔化学奖。
如果说,沃森和克里克发现DNA双螺旋结构,标志着分子生物学时代的开启,那么PCR技术则标志着分子生物学的腾飞。PCR技术的出现,彻底变革了生物化学、分子生物学、遗传学、以及现代医学等等。
一、目的基因的筛选与获取
(三)利用PCR获取和扩增目的基因:
1.发明者
DNA半保留复制
原理
体外
操作环境
对目的基因的核苷酸序列进行大量复制
目的
可在短时间内大量
扩增目的基因
优点
聚合酶链式反应
全称
它是一项根据DNA半保留复制的原理,在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
PCR
一、目的基因的筛选与获取
(三)利用PCR获取和扩增目的基因:
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一、目