内容正文:
生物技术与实践练习
1.某生物兴趣小组分离提纯土壤,得到某种细菌,然后将其接种到无菌的三角瓶中进行培养。
请回答下列问题:
(1)培养细菌时往往将pH值调至 ,常见的微生物接种方法有 (任写两种),无论哪种接种技术核心都是 。培养液中出现 现象,就说明有大量细菌产生。
(2)该实验小组成功分离出某品种的细菌后,用移液器设定1 mL的接种量并分别接种于三个盛有等量液体培养基的锥形瓶中,放置在摇床上培养,设定摇床转速分别为210 r/min、230 r/min、250 r/min,检测结果如图所示。从图中数据你可以得出什么结论: 。由此可知该生物的代谢类型为 (填“需氧型”“厌氧型”或“兼性厌氧型”)。
(3)某同学为探究该种细菌能否利用尿素作为氮源,请简要写出实验思路: 。实验结果表明,该菌不能利用尿素作为氮源,根本原因为 。
2.辣椒疫病是由辣椒疫霉菌侵染引起的一种毁灭性土传病害。实验小组从疫病发病严重田块的辣椒植株根际土壤中分离筛选出两株具有广谱抗性并可在贫瘠营养条件下生长良好的高效拮抗菌株HL-3,回答下列问题:
(1)采集能拮抗辣椒疫霉菌的菌株时,应采集疫病发病严重田块的 (填“健康”或“患病”)辣椒植株根际的土壤,原因是 。采集的土壤样本先置于液体培养基中摇床培养,目的是 。
(2)测定筛选到的不同菌株的拮抗作用效果时,应先在平板的中央位置接种 ,培养1 d后再在距离原菌落2 cm处接种拮抗菌,并置于 中培养,一段时间后通过比较 判断菌株的拮抗能力。
(3)实验小组筛选获得了高效拮抗菌株HL-3。请设计实验,探究HL-3对辣椒枯萎病菌是否也具有拮抗效应(实验材料有HL-3菌液、辣椒枯萎病菌菌液、无菌水、已灭菌的平板等)。简要写出实验设计思路:
。
3.研究人员利用鱼类肠道菌株MA35提取纤维素酶,按照“纤维素酶制备→纤维素酶纯化和鉴定→纤维素酶活力检测→纤维素酶酶学性质研究”的思路开展研究。回答下列问题:
(1)从鱼类肠道中提取菌体后接种到 中进行发酵培养,发酵完毕后将菌体与发酵液分离,菌体再加入缓冲液重新悬浮,利用超声波破碎细胞。制备纤维素粗酶液的思路是 。
(2)对获得的纤维素粗酶液用凝胶色谱柱进行洗脱,该方法纯化纤维素酶的原理是 。纯化后的纤维素酶使用 的方法进行纯度鉴定。
(3)测定酶活力时,需要以 的酶液作为对照组。实验组酶液加入羧甲基纤维素钠溶液,反应30 min后终止反应,以每分钟释放1 mmol 所需要的酶量作为1个酶活力单位。设置30~80 ℃,pH为3.0~10.0的条件进行纤维素酶酶学性质研究,主要目的是 。
4.酵母菌是生产和日常生活中应用极其广泛的一种微生物。图1表示制备固定化酵母细胞的某步操作,图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图,回答下列问题:
(1)酵母菌是理想的酒精发酵菌种,其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于 。在实验室,科研人员经过筛选从混杂的微生物中分离得到优良酵母菌菌株,可采用 的方法在-20 ℃的冷冻箱中进行长期保存。
(2)制酒发酵时需要一定数量的具有活力的酵母菌,在菌种活化的过程中需定时取样,检测酵母菌的生长状况。对某次样品稀释后,经台盼蓝染色后用血细胞计数板计数时应对 (填“蓝色“或“无色”)细胞进行计数,原因是
。
(3)利用固定化酵母细胞进行酒精发酵能降低生产成本。图1所示进行酵母细胞固定化的方法是 ,在用注射器将海藻酸钠和酵母细胞的混合液滴加到X溶液中时,应注意控制好 。制备固定化酶则不宜用此方法,原因是酶 。
(4)图2发酵过程中搅拌的目的是 。在利用固定化酵母细胞按发酵要求进行酒精发酵时,发现发酵液中酸味较重,试分析可能的原因:
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5.鞣质(Tannins)又称单宁,是一类结构复杂的多羟基酚类化合物,在植物中广泛分布,具有止血、杀菌等作用,是常见的中药成分。它不溶于氯仿、