内容正文:
“四翼”检测评价(十一) 基因工程的操作步骤与PCR技术及电泳鉴定
A级——基础综合练
1.(2023·台州九校期中)基因工程受体细胞可以是细菌、动物或者植物细胞,因此将目的基因导入受体细胞的方法也有所差异。下列叙述错误的是( )
A.导入植物细胞常采用农杆菌转化法
B.基因枪法可将目的基因导入植物叶绿体等细胞器中
C.大肠杆菌作为受体细胞时,通常需要使用钙离子处理
D.显微注射只可以将目的基因直接注射给动物受精卵细胞
解析:选D 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法,此外还有基因枪法和花粉管通道法等,A正确;基因枪法可将目的基因导入植物叶绿体等细胞器中,B正确;将目的基因导入微生物细胞时,常用感受态转化法,即需要使用钙离子处理微生物细胞,使之成为感受态细胞,C正确;显微注射可以将目的基因直接注射给动物体细胞或受精卵细胞,D错误。
2.下列有关基因工程的说法,错误的是( )
A.遗传密码的成功破译为基因的分离和合成等提供了理论依据
B.核苷酸序列已知且比较小的基因可以通过PCR扩增仪直接人工合成
C.导入调节渗透压的基因能够提高农作物的抗盐碱、抗干旱的能力
D.我国转基因抗虫棉培育中目的基因的转化,采用的独创方法是花粉管通道法
解析:选B 科学家破译编码氨基酸的遗传密码为基因的分离和合成提供了理论依据,与基因工程直接相关,A正确;若目的基因比较小,核苷酸序列已知,可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成,B错误;通过基因工程技术导入调节渗透压的基因可以增强细胞的吸水能力,能够提高农作物抗盐碱、抗干旱的能力,C正确;我国转基因抗虫棉培育中目的基因的转化,采用的独创方法是花粉管通道法,D正确。
3.将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。关于这些大肠杆菌,下列叙述错误的是( )
A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B.每个重组质粒至少含一种限制性内切核酸酶识别位点
C.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
D.每个限制性内切核酸酶识别位点至少插入一个ada
解析:选D 质粒上可能存在多个该限制性内切核酸酶识别位点,不是每个限制性内切核酸酶识别位点都要插入一个目的基因,还要看限制性内切核酸酶切割后的黏性末端是否与目的基因的黏性末端成功连接,D错误。
4.据研究,流感病毒表面的S蛋白是其主要的病毒抗原,在康复病人的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。如图为研制流感病毒疫苗的部分过程。下列叙述错误的是( )
A.对病人进行检测可使用带标记的S基因做探针
B.使用PCR选择性扩增的前提条件是掌握S基因的核苷酸序列
C.过程②通常是将S基因和质粒连接以构建重组DNA分子
D.S基因与培养的动物细胞核DNA整合是其稳定遗传的关键
解析:选B 对病人进行检测时以S基因单链作为探针,若出现杂交链则说明细胞内有病毒存在,A正确;使用PCR选择性扩增的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列,便于根据这一序列合成引物,不需要掌握S基因的全部序列,B错误;过程②是利用表达载体构建重组DNA分子,通常是将S基因和质粒用相同的限制性内切核酸酶处理后连接以构建重组DNA分子,C正确;S基因整合到细胞核DNA分子上后能使S基因在细胞内稳定存在,是其稳定遗传的关键,D正确。
5.微生物常被用于基因工程中。下列相关叙述正确的是( )
A.从耐热的细菌中获取PCR所需的DNA连接酶
B.大肠杆菌、酵母菌等是基因工程常用的载体
C.作为载体的细菌质粒需具有合成抗生素的基因作为标记基因
D.常利用土壤农杆菌将目的基因导入植物细胞
解析:选D 从耐热的细菌中获取PCR所需的DNA聚合酶,即耐高温的Taq DNA聚合酶,A错误;大肠杆菌、酵母菌等是基因工程常用的受体细胞,基因工程常用的载体有质粒、噬菌体和动、植物病毒,B错误;作为载体的细菌质粒含有荧光等标记基因也能作为载体,C错误;将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,D正确。
6.许多大肠杆菌的质粒上含有LacZ基因,其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如图。图中菌落①、②、③的颜色分别为( )
A.蓝色、白色、蓝色 B.蓝色、蓝色、白色
C.蓝色或白色、白色、白色 D.白色、蓝色、白色
解析:选B 用限制性内切核酸酶EcoRⅠ切割质粒时,会破坏质粒上的LacZ基因,但切割后的质粒自身环化以及切割后的两质粒相互连接环化后,LacZ基因又被修复,其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG存在时,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,所以菌落①②呈现蓝色;菌落③导入的是重组质粒,其Lac