内容正文:
第1节 植物细胞工程
第2章 细胞工程
科技探索之路 | 细胞工程的发展历程
科技探索之路 | 细胞工程的发展历程
细胞工程的概念:
应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
原理和方法
操作水平
目的
分类
细胞生物学、分子生物学和发育生物学
细胞器、细胞或组织水平
获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品
植物细胞工程和动物细胞工程
科技探索之路 | 细胞工程的发展历程
哈伯兰特提出了细胞全能性的理论,但相关的实验尝试没有成功。
斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚,为细胞全能性理论提供了强有力的支持。
科金用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁,成功获得了原生质体
古哈等在培养毛曼陀罗的花药时,首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚。
卡尔森诱导烟草种间原生质体融合,获得了第一株体细胞种间杂种植株。
土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后,该质粒应用于植物分子生物学领域,促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。
1902年
1958年
1960年
1964年
1971年
1974年
一 植物细胞工程的基本技术
从社会中来
“其茅葺,其叶青青,犹绿衣郎,挺节独立,可敬可慕。迨(dài)夫花开,凝晴滚露,万态千妍,薰(xūn)风自来,四坐芬郁,岂非入兰室乎!岂非有国香乎!”这是我国历史上第一部兰谱——《金漳(zhānɡ)兰谱》(宋·赵时庚)中对兰花的一段描述。从古至今,我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征,很多人喜欢养兰花。但是,兰花种子通常发育不全,在自然条件下萌发率极低;传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题,如果靠自然繁殖,兰花的价格可想而知了。如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖,从而走入寻常百姓家呢?
植物组织培养技术
一、植物组织培养技术
(1)概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
(3)体现细胞全能性的标志:
细胞 → 完整个体或其他各种细胞
在生物的生长发育过程中,并不是所有的细胞都表现出全能性的原因?
在特定时间、空间条件下,基因的选择性表达。
(4)全能性大小比较:
分化程度越高,全能性越低
1.植物细胞工程的理论基础
——植物细胞的全能性
植物细胞的全能性>动物细胞全能性
受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞(精细胞、卵细胞)>体细胞
(2)细胞具有全能性的根本原因:
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全部遗传物质。
一、植物组织培养技术
(1)概念:
(3)一般过程:
指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
(2)理论基础:
植物细胞的全能性
2.植物组织培养技术
接种外植体
诱导愈伤组织
诱导生芽
诱导生根
移栽成活
生殖方式:无性生殖分裂方式:有丝分裂
离体培养的植物器官、组织或细胞被称为外植体
探究∙实践 - 菊花的组织培养
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
根、芽等
试管苗
驯化移栽
完整植株
1.实验原理:
(1)植物细胞一般具有全能性。
(2)在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞可以经过脱分化形成愈伤组织,将愈伤组织接种到含特定激素的培养基上,就可以诱导其再分化成胚状体,长出芽和根,进而发育成完整的植株。
相关概念
①脱分化:
在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞失去其特有的结构和功能,转变为未分化的细胞,进而形成愈伤组织的过程。
②愈伤组织:
脱分化形成的不定形的薄壁组织团块。
③再分化:
愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程。
特点:细胞排列疏松无规则、高度液泡化、色浅,具有较强的分裂能力
(3)植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素,它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
1.实验原理:
探究∙实践 - 菊花的组织培养
生长素/细胞分裂素 结果
比值高(>1)
比值低(<1)
比值适中(=1)
有利于根的分化,抑制芽的形成
有利于芽的分化,抑制根的形成
促进愈伤组织的形成
生长素类作用:用于诱导细胞的伸长生长和根的分化;
细胞分裂素类作用:促进组织细胞的分裂或从愈伤组织和器官上分化出不定芽。
探究∙实践 - 菊花的组织培养
2.材料用具
①外植体:
幼嫩的菊花茎段
(容易诱导形成愈伤组织)
②体积分数为70%的酒精:
对手、超净工作台、外植体进行消毒
③质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液:
对外植体进行消毒
④无菌水:
清洗外植体
⑤培养基(P116--参见本书附录1)
包括无机营养成分(水和无机盐)、有机营养成分(蔗糖、氨基酸、维生素等)、特定浓度