项目十二紫外一可见分光光度法（课件）《《分析化学基础（供药学类专业用第2版）》紫外-可见分光光度法概述同步教学（中国医药科技出版社第二版）

紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法 1．物质的结构与紫外吸收光谱的关系 2．紫外吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用 难点 1．光的吸收定律及其应用 2．分光光度计的使用方法 重点 重 点 难 点 1 基础知识 目录/ DIRECTORY 2 紫外-可见分光光度法的基本原理 3 显色反应及测定条件的选择 5 定性与定量分析方法 4 紫外-可见分光光度计 6 应用与示例 第一节 基础知识 光学分析法：根据物质发射的电磁辐射或物质与辐射的相互作用（吸收、发射、折射等）建立起来的分析方法称为光学分析法。 光学分析法的特点： 灵敏度高------10-5 mol·L-1 ～10-6 mol·L-1 相对误差小------2%-5% 应用广泛-----医药、卫生、环保、化工等领域。 1.光学分析法？ 光是一种电磁辐射，又称电磁波。 以是否有能级跃迁分为 光谱法：如荧光分光光度法、原子吸收、 UV－vis、IR、核磁共振 非光谱法：折光分析法、旋光分析法 当辐射能作用于物质时，物质内部发生能级跃迁，记录由能级跃迁所产生的辐射能强度随波长（或变化单位）的变化，所得到的图谱称为光谱。依据物质的光谱进行定性、定量和结构分析的方法称为光谱分析法。 2.光谱分析法？ 按电磁辐射源的波长不同，光谱分析法分为紫外光谱法、可见光谱法、红外光谱法等。 紫外-可见吸收光谱法（UV-Vis）是用分光光度计依据溶液中的吸光物质对紫外和可见光区（200nm～760nm）辐射能的吸收来研究物质的组成和含量的分析方法，也称紫外-可见分光光度法。 3.紫外-可见分光光度法？ 光学分析法 光谱分析法 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法的特点 　　1．灵敏度高 10-4 g·ml-1 ～10-7 g·ml-1 　　2．准确度高 0.2% 　　3．精密度好 　　4．选择性好 　　5．仪器设备简单，价格低廉， 易于普及；操作简便，测定快速 　　6．应用范围广泛 二、电磁辐射和电磁波谱 光：一种电磁辐射，也叫电磁波，具有波粒二象性。 c＝λυ E＝hυ （一）电磁辐射 波动性 光波一般用波长λ、频率ν、波数σ表示 波长：光波在传播方向上具有相同震振动相位的相邻两 点间的直线距离，用（nm）表示。 频率：每秒钟光波的振动次数，用赫兹（Hz）表示。 波数：每厘米长度中的波的数目，单位为cm-1。 粒子性 光波是由一颗颗不连续的光子构成的粒子流。物质发射和吸收电磁波是量子化的，即不连续地、一份一份地发射或吸收，每一份称一个光子。 光子的能量与辐射频率成正比、与波长成反比。 E：光子的能量（J, 焦耳） ：光子的频率（Hz, 赫兹） ：光子的波长（cm） c ：光速（2.99791010 cm.s-1） h ：Plank常数（6.625610-34 J.s 焦耳.秒） 电磁波谱：把电磁辐射按照波长大小顺序排列起来，就称为电磁波谱。紫外光区和可见光区仅是电磁波谱中的一部分。 （二）电磁波谱 电磁辐射区段 波长范围 能级跃迁的类型 γ射线 10-3~0.1nm 原子核能级 X射线 0.1~10nm 内层电子能级 远紫外辐射 10~200nm 内层电子能级 紫外辐射 　　 200~400nm 价电子或成键电子能级 可见光区 　　　 400~760nm 价电子或成键电子能级 近红外辐射 0.76~2.5μm 涉及氢原子的振动能级 中红外辐射 2.5~50μm 原子或分子的振动能级 远红外辐射 50~500μm 分子的转动能级 微波区