1.2微生物的培养技术及应用第2课时导学案-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

学科 生物 年级 高二 时间 课题 1.2 微生物的培养技术及应用 课型 新授课 课时 第2课时 主备教师 学习目标 1.运用适应观，说明选择培养基的原理。 2.采用归纳与概括等方法，阐述测定微生物数量的常用方法。 知识填空 知识点二 微生物的选择培养和计数 （一）选择培养基 1.概念 2.原理 阅读教材P16思考∙讨论，回答下列问题； ①如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ ②该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 3.选择培养基四种常见制备方法或实例 （二）微生物的选择培养——稀释涂布平板法（教材P17） ①铲取土样，将样品装入纸袋中。将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 ②取 上清液加入盛有 无菌水的试管中，依次等比稀释。 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有 的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待 后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 （三）微生物的数量测定 方法1：间接计数法： ① 原理 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ② 计数原则 选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为_______、适于计数的平板。 在同一稀释度下，应至少对___个平板进行重复计数，然后求出_______。 ③ 计算公式 例题：4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为_____________个。 方法2：直接计数法： ①原理： ②优点： ③缺点： 比较稀释涂布平板法和显微镜直接计数法 两种纯培养方法的比较 （四）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1. 提出问题 ① 如何分离土壤中能分解尿素的细菌？ ② 如何计算每克土壤样品中有多少分解尿素的细菌？ 2. 基础知识 绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成 的微生物才能分解尿素。 利用尿素作为 的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 3. 实验过程 Ⅰ.土壤取样 ①取样地点要求： 。 ②取样过程：铲去表层土（一般3cm左右）。细菌绝大部分分布在距地表 的土壤层。 ③注意事项：取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后一定要洗手。 Ⅱ.样品的稀释与涂布平板 ①每个浓度至少设置 个平板，1、2、3平板是选择培养基（实验组，三个重复），4为牛肉膏蛋白胨培养基。 思考1：设置4为牛肉膏蛋白胨培养基的目的是什么？ 思考2：若出现什么现象则能说明选择培养基具有筛选作用？ ②如何验证培养基中是否含有杂菌？ 案例分析； 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。 1.甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。 2.乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。 你认为这两位同学的做法正确吗？ 如果有问题，错在哪？ 如何改进？ Ⅲ.微生物的培养与观察 ①培养条件：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。 ②观察：每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。（一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，如形状、大小和颜色等） 4.进一步探究 利用尿素作为唯一氮源的培养基分离出的微生物不一定都是能分解尿素的微生物，因为有些微生物可以利用能分解尿素的细菌的代谢物进行生长繁殖。对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法。你可以查阅相关资料,进一步设计实验来鉴定自己分离的菌种。 5.拓展：鉴别培养基 在培养基中加入某种指示剂或化学药品（不影响微生物正常生长），使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应。从而达到鉴定的作用。 核心归纳——选择培养基与鉴别培养基 1.研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌。判断下列相关表述是否正确。 （1）这种培养基是一种选择培养基。（ ） （2）利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤。（