内容正文:
2022级选择性必修三学案
第2节 基因工程的基本操作程序
1.科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞,培育成了抗虫杨树。下图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒,图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因,NeoR表示新霉素抗性基因,箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是( )
A.目的基因插入质粒的T-DNA上,才能整合到受体细胞染色体中
B.构建基因表达载体时为了防止目的基因和质粒的自身环化,最好选用EcoRⅠ和PstⅠ
C.成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素
D.可用PCR等技术或抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否成功表达
2.限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及其切割位点分别是-C↓AATTG-和-G↓AATTC-。如图表示某一目的基因片段与质粒拼接形成重组质粒的过程,下列相关叙述错误的是( )
A.用限制酶EcoRⅠ切割目的基因,同时用限制酶MunⅠ切割质粒
B.构建重组质粒时,会形成5种脱氧核苷酸序列(最多考虑DNA片段两两连接)
C.将重组质粒同时用这2种限制酶切割,则会形成1种长度的DNA片段
D.限制酶能识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割磷酸二酯键
3.为初步探究某动物phb2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因,研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因(简称phb2基因)编码序列,大小约为0.9 kb,并利用大肠杆菌表达该蛋白。图1为所用质粒示意图,已知phb2基因序列不含图1中限制酶的识别序列。从转化后的大肠杆菌中提取质粒,再用选中的两种限制酶进行酶切,酶切产物经电泳分离,结果如图2,下列叙述错误的是( )
A.为使phb2基因与载体正确连接,应在扩增的phb2基因两端分别引入KpnⅠ和EcoRⅠ两种不同限制酶的识别序列
B.需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因
C.需用CaCl2溶液处理大肠杆菌,以提高转化率
D.图2中的3号质粒有可能是含目的基因的重组质粒
4.自然界中很少出现蓝色的花,天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)构建基因表达载体(如图),通过农杆菌转化法导入白玫瑰中,在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列相关叙述错误的是( )
注:PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ为不同限制酶。
A.可用氯化钙溶液处理农杆菌,有助于重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中
B.将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ,将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeⅠ和SacⅠ
C.sfp和idgS基因具有各自的启动子,前者调控后者的表达
D.农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上
5.下列关于几种酶作用的叙述,不正确的是( )
A.DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接
B.RNA聚合酶能与基因的特定位点结合,催化遗传信息的转录
C.一种限制酶能识别多种核苷酸序列,切割出多种目的基因
D.DNA聚合酶能把单个脱氧核苷酸分子连接到DNA单链末端
6.以下几种酶与图中所指的化学键形成或断裂有关的有几种( )
①限制性内切核酸酶 ②DNA连接酶
③RNA聚合酶 ④解旋酶 ⑤DNA聚合酶
A.一种 B.两种 C.三种 D.四种
7.利用基因工程技术,将T-DNA片段插入A基因中导致A基因突变,可获得突变体。为获知T-DNA插入位置,可用PCR技术进行扩增,应从下图选择的引物组合是( )
A.引物Ⅰ与引物Ⅱ B.引物Ⅰ与引物Ⅲ C.引物Ⅱ与引物Ⅳ D.引物Ⅲ与引物Ⅳ
8.为了对重金属污染的土壤进行生物修复,研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白(HMA3)基因与外源高效启动子连接,导入杨树基因组中(如图)。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因,同时避免内源HMA3基因的干扰,在进行PCR扩增时,应选择的引物组合是( )
A.①+③ B.①+② C.③+② D.③+④
9.下列关于基因工程的叙述,错误的是( )
A.起始密码子和终止密码子都不属于基因表达载体的组成部分
B.限制性内切核酸酶能识别特定的核苷酸序列,而DNA连接酶不能识别
C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原不具有生物活性
D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
10.Bt抗虫蛋白能破坏棉铃虫的消化系统,科研人员从苏云金芽孢杆菌体内获得了Bt基因,拟利用大肠杆菌生产Bt抗虫蛋白。如图是选用的质粒及几种相关限制酶的识别位点。下列叙述正确的是( )
A.Bt基因和青霉素抗性基因均为目