内容正文:
选择性必修三 基因工程的基本操作程序
第2节 基因工程的基本操作程序
学习目标
核心素养对接
1.阐明基因工程的原理和基本操作程序;
2.针对人类生产或生活中说的某一需求,选取适当的基因工程的技术和方法,尝试设计某一转基因产品的方案。
1.科学思维:结合生产实例,举例说出基因工程的基本操作程序。
2.科学探究:针对人类生产和生活的某一需求,尝试提出初步的基因工程构想,完成初步设计。
课前案
一、目的基因的筛选与获取
1.目的基因
(1)概念:用于改变 或获得 等的基因。
(2)实例:培养转基因抗虫棉用到的目的基因是 。
2.筛选合适的目的基因
(1)较为有效的方法:从相关的 和 的基因中进行筛选。
(2)实例:在培育转基因抗虫棉之前,科学家不仅掌握了Bt基因的 ,也对Bt基因的表达产物—— 有了较为深入的了解。
(3)认识基因结构和功能的技术方法: 技术、 数据库、 工具。
3.利用PCR获取和扩增目的基因
(1)PCR的含义:PCR是 的缩写,它是一项根据 的原理,在体外提供 的各种组分与反应条件,对 进行大量复制的技术。
(2)条件:DNA模板、分别与两条模板链结合的2种 、四种 、 。
(3)过程:
①变性:温度上升到90 ℃以上,目的基因DNA 。
②复性:温度下降到50 ℃左右时, 通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
③延伸:温度上升到72 ℃左右时,溶液中 在耐高温的 的作用下加到引物的 端合成子链。
④重复循环多次。
(4)结果:每次循环后目的基因的量增加一倍,即成 形式扩增(约为2n)。
二、基因表达载体的构建
1.构建基因表达载体的目的
(1)使目的基因在受体细胞中 ,并且可以 给下一代。
(2)使目的基因能够 和发挥作用。
2.基因表达载体的组成[填图]
3.基因表达载体的构建
首先用一定的 切割载体,使它出现一个切口,然后用 限制酶或 的限制酶切割目的基因的DNA片段,再利用 将目的基因片段拼接到载体的切口处。
三、将目的基因导入受体细胞
1.转化:目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内 和 的过程。
2.目的基因导入受体细胞的方法
(1)目的基因导入植物细胞
① 法
Ⅰ.用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入 中。
Ⅱ.在植物受粉后的一定时间内,剪去柱头,将DNA溶液滴加在花柱切面上,使目的基因借花粉管通道进入 。
②农杆菌转化法
Ⅰ.农杆菌的特点:农杆菌自然条件下侵染 植物和 植物;农杆菌的Ti质粒上的 能够整合到所侵染细胞的 上。
Ⅱ.转化方法:将目的基因插入农杆菌 中,让农杆菌侵染植物细胞。
(2)目的基因导入动物细胞
①常用方法: 法。
②常用受体细胞: 。
(3)目的基因导入微生物细胞
①方法:用 处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,然后将基