3.1重组DNA技术的基本工具导学案-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

2022级选择性必修3生物学案 第1节　重组DNA技术的基本工具 【学习目标】1. 阐明DNA重组技术所需的三种基本工具的作用 2．进行DNA的粗提取与鉴定 3.关注基因工程的社会议题，参与讨论基础理论和技术发展如何催生基因工程。 【重点难点】DNA重组技术所需的三种基本工具的作用及DNA的粗提取与鉴定 教材研读 一、基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，通过 等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 水平上进行设计和施工的，因此又叫作 技术。 二、DNA重组技术的基本工具 1．“分子手术刀”— (1)来源：主要来自 。 (2)功能：能够识别双链DNA分子的特定 ，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 (3) 限制酶的切割产物：产生 或 。 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是 ；当限制酶在它识别序列的中心轴线处将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是 。 2．“分子缝合针”— (1)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 。 (2)种类[填表] 种类 比较 E.coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 来源 特点 只能连接 既可以连接黏性末端，又可以连接 3.“分子运输车”—— (1)载体——质粒 ①质粒的本质：是一种裸露的、结构简单，独立于 或 之外，并具有 能力的环状双链DNA分子。 ②质粒适于作基因运载体的特点和条件 Ⅰ.质粒分子上有一个至多个 位点，供外源DNA片段（基因）插入其中。 Ⅱ.携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中 ，或 上，随 同步复制。 Ⅲ.人工改造的质粒常带有 ，如： 、 _____ 等，便于 。 (2)载体——噬菌体、动植物病毒等。 四、DNA的粗提取与鉴定 1．实验原理 (1) 不溶于酒精， 溶于酒精。 (2)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于 溶液。 (3)在一定温度下，DNA遇 试剂会呈现蓝色。 2．实验步骤 (1)研磨：取30g洋葱切碎，倒入10ml 研磨。 (2)除杂：漏斗中垫上纱布过滤后，在4℃冰箱静置后取 。或直接在1500r/min的转速下离心后取 。 (3)提取：加入体积相等、体积分数为95%的酒精，溶液出现白色的丝状物是 。 方法一：用玻璃杯按 方向搅拌，卷起丝状物，用滤纸吸去上面的水分。 方法二：10000r/min的转速下离心5min，取 晾干。 (4)鉴定： 项目 A B 2mol/L的NaCl溶液 5mL 丝状物或沉淀物 不加 加入 __________试剂4mL 沸水中加热5min 现象 __________ __________ 3.1　重组DNA技术的基本工具 答案 教材研读 1． 转基因 DNA分子 重组DNA 2． 1.限制性内切核酸酶(又称限制酶) 原核生物 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 黏性末端 平末端 黏性末端 平末端 2.DNA连接酶 磷酸二酯键 大肠杆菌 T4噬菌体 黏性末端 平末端 3.基因进入受体细胞的载体 真核细胞的细胞核 原核细胞拟核DNA 自我复制 限制酶切割 进行自我复制 整合到受体DNA 受体细胞DNA 标记基因 四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因