2024届高三生物二轮复习主题突破练29：突破基因工程类大题

主题突破练29 突破基因工程类大题 突破1　基因工程的综合题 题型一　限制酶的选择技巧 (1)根据目的基因两端的限制酶切点选择限制酶 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。 ②为避免目的基因和质粒的自身环化和反向连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点，如图乙) (2)根据质粒的特点选择限制酶(如图) [例1] (2023·巴蜀中学适应考)科学家从大量木乃伊中获得少量木乃伊DNA，进行克隆，复制了2400年前的DNA。兴趣小组同学模拟了其中部分研究过程，设计了如下实验(MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ为4种限制性内切核酸酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG，如图所示)。请回答以下问题： (1)从解旋过程进行分析，PCR扩增木乃伊基因与体内DNA复制过程不相同的地方是______________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ (答出两点)。 (2)若将图乙中质粒和图甲中木乃伊基因通过同种限制酶处理后，构建重组质粒，应选用的限制酶是________，选择理由是____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________。 (3)经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因不能正确表达，最可能的原因是___________________________________________________________ ____________________________________________________________________。 (4)据图丙分析，培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A、B还应分别含有________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是________菌落中的细菌。 题型二　PCR技术——聚合酶链式反应 [例2] (2023·重庆市调研)DNA分子杂交时，常需要大量的单链DNA探针。不对称PCR是一种常见的单链DNA探针制备方法，其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物。在PCR反应的早期10～15个循环中，扩增产物主要是双链DNA，当后期数量较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链。 (1)若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用引物____________；PCR反应缓冲体系中一般要添加________以激活耐高温的DNA聚合酶。 (2)进行最初10～15个循环的目的是________________________________。如果体系中原模板DNA的数量为a，最初10次循环产物为双链，后15次循环产物为单链，则最终获得的单链探针数为________。因为DNA单链与双链的分子量不同，可通过________将单链探针DNA分离出来。 (3)为精确控制产物生成量，科学家尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物，在进行一定的循环次数后，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________。 突破2　创设情境　突破高考长句 【事实概述类】 1.如果让你利用鲜奶和少量的酸奶制作酸奶，在制作过程和制作完成后需要控制的条件有__________________________________________________________ ____________________________________________________________________。 2.如果利用酵母菌发酵产生的果酒进一步发酵得到果醋，除需要加入醋酸菌外，