内容正文:
微生物的实验室培养
第一章 发酵工程
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新冠病毒
禽流感病毒
微生物
将下列生物按照结构组成进行分类
大肠杆菌
酵母菌
草履虫
青霉
将下列生物按照结构组成进行分类
有细胞结构
原核生物:
真菌:酵母菌、霉菌(红曲霉、青霉)
细菌、蓝藻
病毒
结构简单的动植物:小球藻、草履虫
无细胞结构
真核生物:
微生物
微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称。包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。本章主要指用于发酵的细菌和真菌。
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饮用水的卫生标准:
1ml水样中细菌总数不得超过100个,1L水样大肠杆菌总数不得超过3个。
怎样判断一杯水中大肠杆菌数量是否符合标准?
问题探讨
不借助显微镜能看到微生物吗?
菌落:微生物在固体培养基表面或内部可以形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。
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思考:如何获得纯净的微生物培养物?
1.提供适合该微生物生长繁殖所需的营养物质和环境条件
2.确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来
培养基的配制
无菌操作
分离纯化
培养基的配制
什么是培养基?
液体培养基
植物
组织
培养
培养基
固体培养基
?
琼脂
培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
酵母菌
培养液
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回忆酵母菌培养液和植物组织培养的培养基成分,我们应该如何培养大肠杆菌?向培养基中加入哪些成分?为什么要加入这些物质?
葡萄糖
氨基酸
无机盐
水
CHO
CNHONS
碳源
氮源
除了以上营养物质,还需要考虑哪些环境条件?
培养基的配制
无机盐
水
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1.基本成分:水、碳源、氮源、无机盐
2.培养基内所需的其他条件
(1)pH
(4)特殊营养物质
(2)温度
(3)氧气的含量
霉菌-酸性,细菌-中性或弱碱性
如生长因子(细菌生长必需,而自身不能合成或合成不够的化合物)
例如乳酸杆菌-添加维生素
需氧/厌氧
培养基的配制
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培养大肠杆菌时,常用牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基,
分析培养基的营养组成:
不同微生物利用的碳源相同吗?培养蓝藻所用的碳源?
培养基的配制
碳源、氮源、维生素
无机盐
碳源、氮源、维生素
水
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碳源
无机碳源:
有机碳源:
CO2、CO32-、HCO3-
牛肉膏、蛋白胨、淀粉
氮源
无机氮源:
有机氮源:
NH4+、NO3-
牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
自养微生物
异养微生物
1.基本成分:水、碳源、氮源、无机盐
培养基的配制
2.培养基内所需的其他条件
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思考:
1.为何培养基中含有水、碳源、氮源、无机盐这四类基本成分?
2.病毒能用培养基直接培养么?
不能,病毒无法独立生存,必须寄生在细胞内。
这些物质含有微生物生长发育所需要的基本元素:C、H、O、N,
是合成生物大分子蛋白质、核酸等的必需元素。
培养基的配制
碳源
无机碳源:
有机碳源:
CO2、CO32-、HCO3-
牛肉膏、蛋白胨、淀粉
氮源
无机氮源:
有机氮源:
NH4+、NO3-
牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
自养微生物
异养微生物
1.基本成分:
培养基的配制
培养基内所需的其他条件:
水、碳源、氮源、无机盐
2.培养大肠杆菌和硝化细菌时分别提供什么碳源和氮源?为什么?
pH、温度、氧气含量、特殊营养物质
3.分离某种微生物用哪一类培养基?
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培养基的类型
根据物理状态分类
类型 配制特点 用途
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
用于工业生产、连续培养
用于观察微生物的运动
用于微生物的分离、计数、鉴定、保藏菌种
不加凝固剂
加入凝固剂
加入少量凝固剂
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培养基的类型
根据化学成分分类
合成培养基
天然培养基
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培养基的类型
根据化学成分分类
培养基的类型
根据用途分类
选择培养基
概念:一种能将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。
依据:微生物的特殊营养需求和生理功能特性
方法:在基础培养基中添加或去除某种物质,以达到允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的目的。
例如:以纤维素为唯一碳源的培养基;添加了青霉素的培养基。
如何筛选出自养微生物?
培养基的类型
根据用途分类
鉴别培养基
概念:用于快速分类鉴定不同类型微生物,或分离和筛选产生某种代谢产物的微生物菌种的培养基
方法:在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成,该指示剂会与特定微生物的代谢产物发生颜色反应,借此区分该微生物与其他微生物。
例如:伊红美蓝培养基
培养基的类型
根据用途分类
大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落
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煮沸消毒
(100℃,5~6min)常用
巴氏消毒
不破坏营养成分
化学药物消毒
可擦拭的表面、液体
紫外