内容正文:
第35讲 微生物的培养技术及应用
[课标
要求] 1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。
2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。
3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。
4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。
5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
6.活动:通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落。
7.活动:分离土壤中分解尿素的细菌,并进行计数。
考点要求 考题统计 考情分析
微生物的基本培养技术 2023,北京、全国,填空
2023,北京、浙江
2022,天津、海南 本专题知识难度较高,要求基础要扎实。考查学生对相关微生物培养整体性的认识,或结合一些情景信息或表格信息设置题目,考查学生的应变能力、获取信息和综合分析能力。
微生物的选择培养和计数 2023,辽宁、江苏、山东、广东,选择
2022,辽宁、江苏、,选择
2022,湖南,填空
考情分析
微生物的选择培养和计数
考点一
培养基及微生物的纯培养技术
考点二
重温高考 真题演练
课前自主检测
1.培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质。( )
2.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。 ( )
3.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上。 ( )
4.平板划线法中每一次划线前要将接种环灼烧。 ( )
5.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。 ( )
6.选择培养基可以鉴定某种微生物的种类。 ( )
7.对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法,而不能用平板划线法。 ( )
8.筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中,尿素是唯一的氮源。 ( )
9.分解尿素的细菌在分解尿素时,可以将尿素转化为氨,使培养基的酸碱度降低 ( )
10.统计菌落数目时为保证结果准确,一般选择菌落数目最多的平板进行统计。 ( )
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1
培养基的配制
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(1)概念:
(2)作用:
(3)类型:
固体培养基 液体培养基 半固体培养基
考点一
培养基及微生物的纯培养技术
实验室培养微生物的基本思路:
①为微生物提供合适的营养
③确保其他微生物无法混入
②为微生物提供合适的环境条件
④将需要的微生物分离出来
培养基
培养环境
无菌技术
分离培养
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
用途
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
天然培养基
合成培养基
固体培养基
液体培养基
半固体培养基
选择培养基
鉴别培养基
(3)类型:
培养基中加氨苄青霉素
选择培养基
培养基+氨苄青霉素
培养基
没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
没有氨苄青霉素抗性的细菌
具有抗氨苄青霉素能力的菌落
伊红和美蓝培养基鉴别大肠杆菌
刚果红培养基鉴别纤维素分解菌
鉴别培养基
(深紫色,有金属光泽)
(4)营养成分:
a.基本成分:
碳源、氮源、水、无机盐
①碳源:
无机碳源:
CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源:
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等
自养微生物
异养微生物
②氮源:
无机氮源:
NH4+、NO3-、NH3等
有机氮源:
牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
注:含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源
③无机盐:
Ca、K 、Mg为大量元素
Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素
凡是能够为微生物提供C、N等元素的营养物质。
(4)营养成分:
表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000ml 水
(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)
b.还需满足微生物对 pH、