1.2.2 微生物的选择培养和计数-【正禾一本通】2023-2024学年新教材高二生物选择性必修3同步课堂高效讲义教师用书（人教版2019 不定项）

高效课时(二)　微生物的选择培养和计数 课程标准 核心素养 1.阐述选择培养基筛选微生物的原理。 2.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 1.生命观念：通过分析选择培养的原理，形成生物与环境相适应的观点。 2.科学思维：通过归纳总结微生物的分离及计数的常用方法，培养归纳与概括、分析与综合的科学方法。 3.科学探究：运用微生物分离及计数的常用方法，设计从土壤中分离分解尿素的细菌并进行计数的实验方案。 4.社会责任：运用微生物的选择培养与计数的方法，解决生产生活中的相关问题 　高效导学01步　预习新知，落实必备知识　　　　　　　　　　　　　 一、选择培养基 1.概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 2.筛选原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 二、微生物的选择培养 1.方法：对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上，也就是要采用稀释涂布平板法。 2.操作步骤 三、微生物的数量测定 1.稀释涂布平板法 (1)计数原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)计数原则 ①一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。 ②通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30～300、适于计数的平板。 ③在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 (3)注意事项：统计的菌落数往往比活菌的实际数目__少__。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。 2.显微镜直接计数法 (1)计数方法：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。 (2)优点：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。 四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.实验原理 (1)绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。 (2)利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 2.实验设计 (1)土壤取样：铲去表层土，在距地表3～8cm的土壤层取样。 (2)样品稀释：测定土壤中细菌的数量，一般选用__1×104、1×105和1×106__倍稀释的稀释液进行平板培养。第一次实验时可以将稀释范围放宽一点。例如，可以将1×103～1×107__倍稀释的稀释液分别涂布到平板上培养，以保证能从中选择出菌落数在30～300的平板进行计数。 (3)培养与观察：细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2d。每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。 3.操作提示 (1)注意安全：将涂布器从酒精中取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧。不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃酒精。 (2)无菌操作：取土样用的用具在使用前都需要灭菌；实验操作均应在火焰旁进行。 (3)做好标记：本实验使用的平板和试管较多，为了避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。 (4)制订计划：本实验耗时较长，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。 【教材问题·心中明】 思考·讨论·提示 P161.设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 2.这种培养基与普通培养基相比，区别只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 探究·实践·提示 P181.如果没有接种的培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。如果接种后的完全培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，说明选择培养基筛选出了一些尿素分解菌。 2.如果得到了两个或多个菌落数为30～300的平板，说明稀释度合适，操作比较成功，能够进行菌落的计数。 3.如果用同一土样进行操作，得到的数据应该比较接近。如果差异很大，就需要从操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因。 【概念辨析·试身手】 (1)选择培养基可以鉴定某种微生物的种类。(×) 提示：选择培养基可以筛选某种微生物，不能鉴定微生物。 (2)稀释涂布平板法既能分离细菌，也能对细菌进行计数。(√) (3)在同一稀释度下，至少要涂布3个平板。(√) (4)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。(√) (5)筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源。(√) (6)统计的分解尿素的细菌菌落数就是样品中分解尿素的活菌数。(×