2.2 动物细胞工程 第一课时课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

书P43 从社会中来：在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行字体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限。 1）使用他人皮肤？ 患者自身的不够用，如何解决？ 2）自身健康皮肤？ 来源不足，又会产生免疫排斥反应 怎样获得大量的自体健康皮肤？ 能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 动物细胞工程 2 第2节 动物细胞工程 1.动物细胞工程常用的技术有哪三个？含义分别指的是什么 2.动物细胞培养需要哪四方面的条件，分别如何满足？ 3.复述动物细胞培养的技术流程，画出流程图 4.悬浮培养、细胞贴壁、接触抑制分别指什么 5.比较动物细胞培养和植物组织培养的区别（培养基、最终物等） 6.干细胞的含义，胚胎干细胞、成体干细胞、诱导多能干细胞分别 如何获取？分化潜能怎能？具体应用实例？iPS的两大优点 7.动物细胞融合与植物体细胞杂交技术的异同点（原理、手段等） 8.为什么说B淋巴细胞与骨髓瘤细胞优势互补？ 9.复述生产单克隆抗体的技术路线，画出流程图 10.单克隆抗体与血清提取抗体相比，有哪两大优点？有哪些应用 11.复述动物体细胞核移植的流程，尤其关键技术节点 首例胚胎移植成功 首创动物组织体外培养法 发现哺乳动物精子获能现象 体细胞核移植成功 试管家兔诞生 创立单克隆抗体技术 胚胎分割移植成功 分离和培养小鼠胚胎干细胞 克隆羊多莉诞生 获得诱导多能干细胞 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。 1890年 1907年 1951年 1958年 1959年 1975年 1978年 1981年 1996年 2006年 2014年 2017年 科技探索之路 动物细胞工程 动物细胞培养 （动物细胞工程技术的基础） 动物细胞核移植 动物细胞融合 动物细胞培养：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 原理：细胞分裂（增殖） 动物细胞培养 动物细胞培养需要哪些必要的条件？ 书P43 动物体内的细胞之所以能够维持正常的生命活动，有些细胞还能不断增殖，是因为机体给那些细胞提供了适宜的条件，包括充足的营养、稳定的内环境等。 （1）充足的营养 含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素...... + 合成培养基 血清 培养： 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。 一般使用液体培养基，也称培养液。 书P43 图2-9 动物细胞培养 （2）稳定的内环境 ①无菌、无毒的环境 如何维持无菌、无毒的环境？ 培养液和所有的培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。 培养液定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 ②适宜的温度、pH和渗透压 温度（36.5±0.5）℃ pH 7.2-7.2 适宜的渗透压 ③适宜的气体环境 通常采用培养皿或松盖培养瓶， 置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱； O2是细胞代谢所必需， CO2的主要作用是维持培养液的pH 动物细胞培养 ①取动物组织 书P45 思考讨论：1.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，那些细胞更易于培养？为什么？ 细胞的增殖能力与供体的年龄有关。幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物的细胞则相反。所以，一般来说，幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养。同样，分化程度越低的细胞增殖能力越强，越容易培养。 动物细胞培养 ①取动物组织 ②分散成单个细胞 书P44 侧栏问题 为什么用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理？这里中酶作用是什么？由此说明细胞间的物质是什么成份？ 机械的方法，或用胰蛋白酶，胶原蛋白酶等处理的方法 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质 可以用胃蛋白酶处理吗？为什么？ 不可以；胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。 ③细胞悬液 加培养液 动物细胞培养 ④原代培养 在培养皿或培养瓶内 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） （动物组织经处理后的初次培养） 细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等 接触抑制 接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。 细胞分裂受阻 圆球形细胞刚开始 铺展贴壁生长（100×） 培养的动物细胞贴壁生长 并进行有丝分裂（100×） 细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×） 动物细胞培养 ④原代培养 在培养皿或培养瓶内 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） 细胞密度过大、有害