内容正文:
第2课时 微生物的选择培养和计数
[学习目标] 1.说明选择培养基的概念和如何设计培养基来分离分解尿素的细菌。 2.归纳与概括测定微生物数量的常用方法。 3.基于微生物的选择培养和数量测定原理, 设计实验分离土壤中的尿素分解菌,并对实验结果进行分析与评价。
知识点一 选择培养基及微生物的选择培养
1.选择培养基
提醒:有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖,因此,能够在选择培养基上生长的不一定都是目的菌株。
2.微生物的选择培养(稀释涂布平板法)
(1)依次等比稀释操作
①编号为1×102~1×107的试管中分别盛有9 mL无菌水。
②将10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。
③取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中,依次等比稀释。
(2)涂布平板操作
(3)培养分离:待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板
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倒置,放入30~37 ℃的恒温培养箱中培养1~2 d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。
[思维辨析]
1.选择培养基能使特定种类的微生物生长。(√)
2.微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(√)
3. 能分解尿素的细菌之所以能分解尿素,是因为其能产生脲酶。(√)
4.稀释涂布平板法既能分离细菌,也能对细菌进行计数。(√)
探究点一 分析选择培养基的组成和功能
1.下面是筛选分解尿素的细菌的培养基的配方,请分析:
组分
含量
KH2PO4
1.4 g
Na2HPO4
2.1 g
MgSO4·7H2O
0.2 g
葡萄糖
10.0 g
尿素
1.0 g
琼脂
15.0 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL
(1)从物理性质看,该培养基属于________培养基,从功能上看属于________培养基。
提示:固体 选择
(2)该培养基是如何实现对分解尿素的细菌的筛选的?
提示:该培养基中唯一氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能够分解尿素,而不能合成脲酶的微生物不能分解尿素,会因缺乏氮源而无法生长繁殖,所以用该培养基能够筛选出分解尿素的细菌。
归纳总结
选择培养基四种常见制备方法或实例
1.加入某些特定的物质(前提是培养基具备全部营养成分)
2.改变培养基的营养成分
3.利用培养基中的“特定化学成分”进行分离
4.通过某些“特殊环境”进行分离
如表为培养某种微生物的培养基配方,下列相关叙述错误的是( )
成分
NaNO3
K2HPO4
KCl
MgSO4·7H2O
含量
3 g
1 g
0.5 g
0.5 g
成分
FeSO4
(CH2O)
H2O
青霉素
含量
0.01 g
30 g
1 L
0.1万单位
A.依物理性质划分,该培养基属于液体培养基
B.由培养基的原料可知,所培养微生物的同化作用类型是异养型,培养的微生物可以是酵母菌
C.培养基中的唯一碳源是(CH2O),唯一氮源是NaNO3
D.若用该培养基培养纤维素分解菌,则应除去(CH2O),再添加纤维素
D [由培养基配方可知,该培养基中不含凝固剂,故依物理性质划分,该培养基属于液体培养基,A正确;由培养基的原料可知,(CH2O)属于有机碳源,因此所培养微生物的同化作用类型是异养型,酵母菌是异养型微生物,B正确;碳源是指能为微生物提供碳元素的物质,氮源是指能为微生物提供氮元素的物质,结合培养基配方可知,培养基中的唯一碳源是(CH2O),唯一氮源是NaNO3,C正确;该培养基中含有青霉素,细菌对青霉素敏感,青霉素会抑制细菌的生长,因此用该培养基培养纤维素分解菌,应除去(CH2O)和青霉素,再添加纤维素,D错误。]
易错提醒
能够在选择培养基上生长的不一定都是目的菌株
原则上选择培养基只能允许特定种类的微生物生长,但实际上,微生物的培养是一个非常复杂的问题,有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖,因此,能够在选择培养基上生长的不一定都是目的菌株。
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针对练1.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )
A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水
B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水
C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水
D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水
A [在A项的培养基中既有尿素作为唯一氮源,又有其他各种成分,可以选择出分解尿素的细菌;B项中无尿素作氮源;而C项中缺少碳源;D项中有牛肉膏、蛋白胨可提供氮源的成分。]
针对练2.物质W是一种含氮有机物,W在培养基中达到一定量时培养基表现为不