内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用
第1课时 微生物的基本培养技术
[学习目标] 1.基于对牛肉膏蛋白胨培养基的实例分析,说明培养基的概念、种类及营养成分的种类和作用。 2.对比分析消毒和灭菌方法异同,认同灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。 3.运用微生物培养原理和无菌技术,通过平板划线接种并分离得到酵母菌单菌落,对实验结果进行分析与评价。
知识点一 培养基的配制和无菌技术
1.培养基的配制
提醒:琼脂是一种微生物难以利用的多糖类物质,在44 ℃以下凝固,在常规培养条件下呈固态。
2.无菌技术
(1)消毒和灭菌
(2)具体操作
①对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染,许多实验操作都应在超净工作台上,并在酒精灯火焰附近进行。
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④实验操作时应注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
(3)连线无菌技术的常用方法及适用对象
[深度思考]
1.(教材P10相关信息)牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。
2.(教材P10相关信息)生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。
3.(教材P11图示)下图为接种环灼烧灭菌的示意图,请据图回答:
(1)酒精灯火焰A、B代表充分燃烧层的是 A 。
(2)灭菌先后的正确顺序是③→①→②(用序号和箭头表示)。
探究点一 分析培养基的种类和营养构成,提高理解能力
1.下表是某培养基的配方,分析回答:
材料
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
琼脂
水
用量
5 g
10 g
5 g
20 g
1 000 mL
(1)根据培养基的物理性质,该培养基属于哪类培养基,理由是什么?
提示:固体培养基。该培养基的配方中含有凝固剂琼脂。
(2)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质是什么?属于有机物还是无机物?
提示:牛肉膏和蛋白胨主要提供碳源和氮源。二者均属于有机物。
(3)该培养基培养的微生物同化作用类型是_____________,理由是_____________。
提示:异养型微生物 该微生物的碳源和氮源是有机物
(4)培养微生物时,培养基中是否必须有碳源和氮源?
提示:不一定,例如培养自养微生物时,一般不需要添加碳源,微生物可以利用空气中的二氧化碳;培养固氮微生物时,一般不需要添加氮源,微生物可以利用空气中的氮气。
归纳总结
培养基营养成分的作用和主要来源
已知某种细菌以CO2为唯一碳源,下列相关叙述正确的是( )
A.可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型
B.无机盐是该细菌不可缺少的营养物质
C.培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D.培养该细菌的培养基中不需要添加氮源
B [该细菌以CO2为唯一碳源,可推测该细菌的代谢类型为自养型,但不能确定是不是需氧型,A错误;微生物生长一般需要水、碳源、氮源和无机盐等营养物质,B正确;CO2不能为微生物提供能量,C错误;氮源是微生物必需的营养物质,培养该细菌的培养基中需添加氮源,D错误。]
易错提醒
不是所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源
1.自养微生物能利用无机碳源(如空气中的CO2),故培养基中不用添加碳源。
2.固氮微生物可利用N2作为氮源,故培养基中不用加入氮源。
3.对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物(尿素除外)既可能是碳源,又可能是氮源和能源。
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针对练1.下列有关培养基的叙述,正确的是( )
A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B.培养基中都只含有碳源、氮源、水和无机盐
C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D.微生物在固体培养基表面生长,可形成肉眼可见的单个细菌
A [培养基是为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源、水和无机盐等营养的基质,A正确;微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等,有的还需要生长因子等特殊的营养,固体和半固体培养基需要琼脂,液体培养基不需要琼脂,B错误;固体培养基中去除琼脂即可制成液体培养基,C错误;微生物在固体培养基表面或内部生长时,可以形成肉眼可见的菌落,但不一定是单个细菌繁殖而来的,D错误。]
针对练2.(2022·湖北襄阳联考)下列关于微生物培养的叙述,正确的是( )
A.微生物在培养液中培养一段时间后用显微镜观察,可见到形成的菌落
B.NH3可以作为硝化细菌的氮源和能源物质
C.任何培养基都必须含有碳源、氮源、无机盐、水和琼脂
D.某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质,比如培养酵母菌时,要添加维生素
B [微生物在固体培养基表面或内部生长,可以形成肉眼可见的菌落,A错误;硝化细菌可利用氧化NH3释放的能量合成有机物,B正确;培养基不一定都含有碳源、氮源,如培养自养型微生