1.7 PCR技术和基因编辑-【金版新学案】2024高考生物大二轮专题复习与测试（新教材，不定项版）

一、选择题 1．(2023·安徽安庆模拟)反转录PCR又称逆转录PCR(RT­PCR)，是以mRNA为模板进行的特殊PCR，过程如图。下列相关叙述错误的是(　　) A．图示过程需要控制温度，否则可能得不到产物 B．RT­PCR技术中，不需已知mRNA的全部序列 C．过程③中子链沿着模板链的5′→3′方向延伸 D．RT­PCR技术可应用于是否被RNA病毒感染的检测 答案：C 解析：图示过程需要控制温度，如变性解旋时温度需要控制在90 ℃左右，A正确；PCR技术中，不需要已知mRNA的全部序列，只需一段已知mRNA的部分序列即可，B正确；过程③中，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3′端开始延伸DNA链，即子链沿着模板链的3′→5′方向延伸，C错误；RT­PCR是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增相结合的技术，可应用于是否被RNA病毒感染的检测，D正确。 2．(2023·山东泰安模拟)环境DNA(eDNA)是“在环境样品中所有被发现的不同生物的基因组DNA的混合”，它涵盖的范围非常广泛，无论是土壤、空气、液体，甚至是排泄物，都可以从中找到可作为样品的eDNA。对所得的样品，可使用普通的聚合酶链式反应(PCR)或直接霰弹枪法(shotgun strategy)测序，能够方便获得多个DNA序列。2018年4月12日，美国华盛顿州立大学助理教授Caren Goldberg通过检测环境DNA(eDNA)，确证了全球第四只斑鳖的存在。下列有关说法不正确的是(　　) A．可分析环境样品中的eDNA分别是属于哪些物种，这与传统的动植物分类调查其实是一致的 B．eDNA技术可寻找环境中是否有单一物种的DNA，用于研究和追踪珍稀物种的分布 C．使用PCR测序，能够方便获得DNA序列 D．每个eDNA中都有一个游离的磷酸基团 答案：D 解析：由于DNA分子具有特异性，所以可分析环境样品中的eDNA分别是属于哪些物种，这与传统的动植物分类调查其实是一致的，A正确；环境DNA(eDNA)技术是一种新型生物资源调查手段，是指从环境中提取DNA片段，根据DNA分子的特异性，结合PCR和DNA测序等分子生物学技术来定性或定量检测目标生物，从而确定其分布状况等，B正确；PCR是一项体外扩增DNA的技术，其原理是DNA的半保留复制，故扩增微量的样品eDNA，可获得大量的DNA序列，C正确；DNA分子是双螺旋结构，有两条脱氧核苷酸链，若是链状DNA分子，则每个eDNA中都有两个游离的磷酸基团，若是环状DNA分子，则没有游离的磷酸基团，D错误。 3．下列操作过程的叙述中错误的是(　　) A．PCR 实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌 B．PCR 所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后，应缓慢融化 C．PCR 所用的缓冲液和酶应分装成小份，并常温储存 D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换 答案：C 解析：PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌，A正确；PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后，应放在冰块上缓慢融化，这样才能不破坏缓冲液中稳定性较差的成分，同样保护酶的活性不被破坏，B正确；PCR 所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20℃环境储存，C错误；在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换，D正确。 4．(2023·辽宁沈阳模拟预测)下图为质粒pUC18，为生产出满足需求的质粒载体，利用定点诱变技术，通过设计具有诱变位点的引物P1和引物P2进行PCR，来实现目标载体的单碱基突变，目的是使质粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别，但依然具有氨苄青霉素抗性。下列相关叙述，错误的是(　　) A．诱变位点位于限制酶Eam1105Ⅰ识别序列中 B．PCR反应体系由P1、P2两种引物、脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶及含Mg2+的缓冲液组成 C．诱变成功的质粒依然具有氨苄青霉素抗性，利用了密码子具有简并性的原理 D．诱变成功的质粒pUC18经过EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ双酶切后进行电泳，只能产生1条条带 答案：B 解析：利用定点诱变使质粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别，因此诱变位点位于限制酶Eam1105Ⅰ识别序列中，A正确；PCR反应体系除由P1、P2两种引物、脱氧核苷酸、Taq DNA聚合酶及含Mg2+的缓冲液之外，还需要有模板DNA，B错误；诱变成功的质粒依然具有氨苄青霉素抗性，由于密码子的简并性，该基因虽然发生了基因突变，但其控制的性状不变，C正确；诱变成功的质粒pUC18只有限制酶EcoRⅠ识别序列，没有限制酶Eam1105Ⅰ的识别序列，因此经过EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ双酶切后进行电泳，只能产生1条