热点7 PCR技术和基因编辑（课件）-【金版新学案】2024高考生物大二轮专题复习与测试（新教材，广东版）

热点七　PCR技术和基因编辑 √ 1．(2023·安徽安庆模拟)反转录PCR又称逆转录PCR(RT-PCR)，是以mRNA为模板进行的特殊PCR，过程如图。下列相关叙述错误的是 A．图示过程需要控制温度，否则可能得不到产物 B．RT-PCR技术中，不需已知mRNA的全 部序列 C．过程③中子链沿着模板链的5′→3′方向 延伸 D．RT-PCR技术可应用于是否被RNA病毒 感染的检测 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 图示过程需要控制温度，如变性解旋时温度需要控制在90 ℃左右，A正确；PCR技术中，不需要已知mRNA的全部序列，只需一段已知mRNA的部分序列即可，B正确；过程③中，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3′端开始延伸DNA链，即子链沿着模板链的3′→5′方向延伸，C错误；RT-PCR是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增相结合的技术，可应用于是否被RNA病毒感染的检测，D正确。 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 √ 2．(2022·辽宁卷)抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是 A．预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制 B．后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分 C．延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制 D．转基因品种经检测含有目的基因后即可上市 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 94 ℃预变性可使模板DNA解旋为单链，72 ℃延伸过程中才会使4种脱氧核苷酸在Taq DNA聚合酶的催化作用下合成子链，A错误；72 ℃，1 min的后延伸过程可使目的基因的扩增更充分，B正确；由于Taq DNA聚合酶只能催化单个的脱氧核苷酸添加到已有的核酸片段(如引物)的3′端，不能从头合成DNA，因此延伸过程中需要引物参与，C错误；为防基因污染，确保安全，我国制定了相关法规和政策进行依法监管，转基因品种需经国家农业转基因生物安全委员会(评价机构)评价安全后才可推广上市，D错误。 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 √ 3．下列操作过程的叙述中错误的是 A．PCR 实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌 B．PCR 所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后，应缓慢融化 C．PCR 所用的缓冲液和酶应分装成小份，并常温储存 D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌，A正确；PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后，应放在冰块上缓慢融化，这样才能不破坏缓冲液中稳定性较差的成分，同样保护酶的活性不被破坏，B正确；PCR 所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20℃环境储存，C错误；在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换，D正确。 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 √ 4．(2023·辽宁沈阳模拟预测)下图为质粒pUC18，为生产出满足需求的质粒载体，利用定点诱变技术，通过设计具有诱变位点的引物P1和引物P2进行PCR，来实现目标载体的单碱基突变，目的是使质粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别，但依然具有氨苄青霉素抗性。下列相关叙述，错误的是 A．诱变位点位于限制酶Eam1105Ⅰ识别序列中 B．PCR反应体系由P1、P2两种引物、脱氧核 苷酸、TaqDNA聚合酶及含Mg2＋的缓冲液组成 C．诱变成功的质粒依然具有氨苄青霉素抗性， 利用了密码子具有简并性的原理 D．诱变成功的质粒pUC18经过EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ双酶切后进行电泳，只能产生1条条带 2 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 利用定点诱变使质粒pUC18不能被限制酶 Eam1105Ⅰ识别，因此诱变位点位于限制 酶Eam1105Ⅰ识别序列中，A正确；PCR 反应体系除由P1、P2两种引物、脱氧核苷 酸、Taq DNA聚合酶及含Mg2＋的缓冲液之外，还需要有模板DNA，B错误；诱变成功的质粒依然具有氨苄青霉素抗性，由于密码子的简并性，该基因虽然发生了基因突变，但其控制的性状不变，C正确；诱变成功的质粒pUC18只有限制酶EcoRⅠ识别序列，没有限制酶Eam1105Ⅰ的识别序列，因此经过EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ双酶切后进行电泳，只能