内容正文:
动物细胞培养
1.动物细胞工程
(1)常用技术:动物细胞培养、______________和________________等。
(2)基础:_______________。
2.动物细胞培养
(1)概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成__________,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞______和______的技术。
动物细胞融合
动物细胞核移植
动物细胞培养
单个细胞
生长
增殖
预习检查
小组长检查,课代表收集问题
(2)培养条件
①营养
a.合成培养基:将细胞所需的___________(糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按______和________严格配制而成的培养基。
b.天然成分:使用合成培养基时,通常需要加入______等一些天然成分,原因是________________________________________________。
c.培养动物细胞一般使用____________,也称为_________。
营养物质
种类
所需量
血清
血清中含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质
液体培养基
培养液
②无菌、无毒的环境
a.对培养液和所有培养用具进行______处理。
b.在______环境下进行操作。
c.培养液需定期______,以便清除________,防止细胞代谢物______对细胞自身造成危害。
③温度、pH和渗透压
a.温度:以36.5 ℃±0.5 ℃为宜。
b.pH:以pH为_________为宜。
c.适宜的渗透压。
灭菌
无菌
更换
代谢物
积累
7.2~7.4
④气体环境
a.组成:动物细胞培养所需气体主要有______和_____。
b.不同气体的作用
O2:____________________。
CO2:___________________。
c.培养容器:通常采用________或____________。
d.培养仪器:含有____________________的混合气体的_____________。
O2
CO2
是细胞代谢所必需的
维持培养液的pH
培养皿
松盖培养瓶
95%空气和5%CO2
CO2培养箱
(3)培养过程
①
悬浮
贴附
②过程
机械的方法
胰蛋白酶
原代
传代
密度
有害代
谢物
营养
接触抑制
(4)相关概念
①细胞贴壁:悬液中分散的细胞往往______在培养瓶的瓶壁上。
②接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_______________时,细胞通常____
_________的现象。
③原代培养:指动物组织经处理后的__________。
④传代培养:______后的细胞培养。
贴附
表面相互接触
停止
分裂增殖
初次培养
分瓶
特别提醒 区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理,使其分散成单个细胞后进行培养,为原代培养;细胞培养过程中出现接触抑制,用胰蛋白酶处理使其从瓶壁上脱离下来分散成单个细胞,然后再用离心法收集,之后,将收集的细胞制成细胞悬浸,分瓶培养,为传代培养。
(1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性( )
(2)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞( )
×
×
动物细胞培养未体现动物细胞的全能性,其原理是细胞增殖。
培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成单层细胞。
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(3)悬浮培养的细胞直接用离心法收集,贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集( )
(4)培养动物细胞的第一代(即第一次细胞增殖)被称为原代培养( )
√
×
原代培养指动物组织经处理后的初次培养,不一定是第一次细胞增殖。
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1).来源:__________、骨髓和_________等多种组织和器官中。
2).类型:______干细胞和______干细胞等。
3).胚胎干细胞(简称ES细胞)
(1)概念:存在于__________中,具有分化为______动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有______和器官甚至_____的潜能。
早期胚胎
脐带血
胚胎
成体
早期胚胎
成年
组织
个体
3.干细胞及应用
(2)局限:胚胎干细胞必须从______中获取,这涉及伦理问题,因而限制了它在医学上的应用。
(3)成果:目前科学家已经分离了兔、牛、猴和人等的ES细胞,并证明了ES细胞可以在体外分化成__________、________和造血干细胞等细胞。
胚胎
心肌细胞
神经元
4).成体干细胞
(1)概念:______组织或器官内的干细胞。
(2)类型
成体
骨髓中的______干细胞
神经系统中的______干细胞
睾丸中的______干细胞
造血
神经
精原
(3)特点:具有______________,只能分化成特定的细胞或组织,______
发育成