1.2.2微生物的选择培养与计数课件2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

微生物的选择培养和计数 预习检查 1.选择培养基 (1)自然界中目的菌的筛选 ①实例：聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出的_____________中提取出来的。 ②依据：水生栖热菌能在____________的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 水生栖热菌 70～80℃ 小组长检查，课代表收集问题 (2)实验室中目的菌的筛选 ①原理：人为提供有利于________生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时___________其他微生物的生长。 ②方法：利用选择培养基分离。 选择培养基：允许__________的微生物生长，同时____________其他种类微生物生长的培养基。 目的菌 抑制或阻止 特定种类 抑制或阻止 2.微生物的选择培养 (1)方法：对样品进行充分稀释，然后将_______涂布到制备好的______培养基上。 (2)稀释涂布平板法的操作过程 ①系列稀释操作 菌液 选择 a.编号为1×102～1×107试管中分别盛有9 mL________。 b.将____ g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。 c.取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 无菌水 10 涂布器灭菌：将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、 涂布器______后，再进行涂布 ②涂布平板操作 取菌液：取0.1 mL菌液，滴加到_______表面 涂布器消毒：将涂布器浸在盛有_____的烧杯中 涂布平板：用涂布器将_____均匀地涂布在培养基表 面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 培养基 酒精 冷却 菌液 (3)培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板______，放入30～37℃的______________中培养1～2 d。 倒置 恒温培养箱 3.微生物的数量测定 (1)稀释涂布平板法 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个______。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少______。 ②计数原则：一般选择菌落数为_________的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。在同一稀释度下，应至少对____个平板进行重复计数，然后求出_______。 活菌 活菌 30～300 3 平均值 ③计算公式 每克样品中的菌株数＝ ×稀释倍数 (2)显微镜直接计数法 一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量，统计的结果一般是________________的总和。 活菌数和死菌数 注意：显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统计总菌数。但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进行计数。 (1)以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基(　　) (2)脲酶能催化尿素分解产生N2，N2可作为细菌生长的氮源(　　) (3)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量(　　) × √ × 10 1.实验设计 (1)土壤取样 ①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。 ②取样部位：距地表约___________的土壤层。 (2)样品的稀释 测定土壤中细菌的数量，一般选用______________________倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放___一点。 3～8 cm 1×104、1×105和1×106 宽 (3)微生物的培养与观察 ①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养_____和培养时间。细菌一般在_________ ℃的温度下培养______ d。 ②观察 a.观察方法：每隔____h统计一次菌落数目，选取______________时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而遗漏部分菌落。 b.记录菌落的特征：包括菌落的_______、_______和______等。 30～37 1～2 24 菌落数目稳定 形状 大小 颜色 温度 2.操作提示 (1)无菌操作：取土样的用具在使用前都需要_______。 (2)做好标记：本实验使用的平板和试管较多，为了避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的________等。 (3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。 灭菌 稀释度 (1)测定不同微生物数量时，接种