内容正文:
[考向解读]
考试要求
1.概述基因工程的原理及技术(含PCR技术)。 2.了解基因工程和蛋白质工程的应用实例。 3.概述细胞工程的基本原理和过程。 4.概述细胞融合与单克隆抗体的应用。 5.阐明动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础及其应用。 6.了解转基因生物、生物武器以及生物技术中的伦理问题。 7.简述生态工程的原理和实例。
备考策略
熟练掌握各工程技术的流程、注意事项等内容,关注相关科技热点的新进展,多尝试用相关原理解释生产实例中遇到的问题,还要积累语言,提高表达能力。
[知识网络]
学生用书↓第121页
考点一 基因工程和蛋白质工程
1.基因工程的3种基本工具
2.熟记基因工程的四个操作步骤
(1)目的基因的获取途径
(2)基因表达载体(重组质粒)的构建
(3)将目的基因导入受体细胞
(4)目的基因的检测与鉴定
3.图解记忆蛋白质工程
4.PCR技术的过程
[原理表述]
1.为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的5′端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是使DNA片段能定向插入表达载体,减少自连和反接。
2.用农杆菌感染时,应优先选用黄瓜受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养,选用这种叶片的理由是叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞。
3.若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是目的基因无复制原点;目的基因无表达所需启动子(答出两点即可)。
学生用书↓第122页
能力一 结合实例分析基因工程的基本操作过程
1.(2023·全国乙卷)GFP是水母体内存在的能发绿色荧光的一种蛋白。科研人员以GFP基因为材料,利用基因工程技术获得了能发其他颜色荧光的蛋白,丰富了荧光蛋白的颜色种类。回答下列问题。
(1)构建突变基因文库。科研人员将GFP基因的不同突变基因分别插入载体,并转入大肠杆菌制备出GFP基因的突变基因文库。通常,基因文库是指______________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)构建目的基因表达载体。科研人员从构建的GFP突变基因文库中提取目的基因(均为突变基因)构建表达载体,其模式图如下图所示(箭头为GFP突变基因的转录方向)。图中①为________________________________________________________________________;
②为______________,其作用是____________________________________________
________________________________________________________________________;
图中氨苄青霉素抗性基因是一种标记基因,其作用是__________________________
________________________________________________________________________。
(3)目的基因的表达。科研人员将构建好的表达载体导入大肠杆菌中进行表达,发现大肠杆菌有的发绿色荧光,有的发黄色荧光,有的不发荧光。请从密码子特点的角度分析,发绿色荧光的可能原因是_______________________________________________________
____________________________________________________________(答出1点即可)。
(4)新蛋白与突变基因的关联性分析。将上述发黄色荧光的大肠杆菌分离纯化后,对其所含的GFP突变基因进行测序,发现其碱基序列与GFP基因的不同,将该GFP突变基因命名为YFP基因(黄色荧光蛋白基因)。若要通过基因工程的方法探究YFP基因能否在真核细胞中表达,实验思路是____________________________________________________________
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