内容正文:
是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品一门综合性的生物工程。根据操作对象的不同,可以分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。
一、细胞工程
细胞工程
植物细胞工程
动物细胞工程
植物组织培养技术
植物体细胞杂交技术
动物细胞培养
动物细胞融合技术与单克隆抗体
动物细胞核移植技术
克隆动物
2.植物组织培养原理:
(1)定义:细胞经分裂分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其它各种细胞的潜能。
(2)原因:植物体的细胞中含有该物种生长发育所必需的全套遗传物质
(3)大小:
(4)全能性表现的条件
(5)并不是所有细胞都能表现出全能性的原因:在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因
会选择性地表达(从而形成生物体的不同组织和器官)
植物细胞的全能性
①离体(最关键)。②严格的无菌条件。③适宜的培养条件。
④适宜浓度和比例的激素。 ⑤一定的营养条件。
分化程度越高,全能性越低,分化程度越低,全能性越高
二、植物组织培养技术
1.概念:将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给于适宜
的培养条件,诱导其形成完整植株的技术
三、植物组织培养技术过程
①脱分化:在一定的激素和营养等条件的诱导下,让已经分化的细胞经过诱导后,
失去其特有的结构和功能,转变成未分化细胞的过程。
②愈伤组织:排列疏松无规则、高度液泡化、无定性状态的薄壁细胞
离体的植物组织器官
(无需光照)
(需光照)
③再分化:脱分化产生的愈伤组织,在一定的培养条件下,再分化出芽、根等器官,进而形成完整的小植株。需要给予适当时间和强度的光照,诱导叶绿素的合成,使试管苗能够进行光合作用。此过程中涉及的生命活动既有细胞增殖(有丝分裂),又有细胞分化。再分化实质:基因的选择性表达。
④激素的作用:植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向;
生长素用量与细胞分裂素用来的比值 结果
比值高 有利于根的分化,抑制芽的形成
比值低 有利于芽的分化,抑制根的形成
比值适中 促进愈伤组织的形成
四、菊花的植物组织培养
外植体:茎的韧皮部(形成层)等。分裂能力强、分化程度低,容易诱导形成愈伤组织
培养基中蔗糖的作用:提供能量,调节渗透压
试管苗不可以直接移栽入土,需先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱内生长几日,将试管苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩上,壮苗后再移栽入土。
注意1:植物组织培养中细胞表现出全能性的条件①离体(最关键)。②严格的无菌条件。③适宜的培养条件。④适宜浓度和比例的激素。 ⑤一定的营养条件。
注意2:适宜的培养条件包括①温度(例如菊花植物组织培养应为18-22℃)。②光照(例如脱分化需避光,再分化需照光)。注意3:一定的营养条件包括 有机营养成分、无机营养成分、特定浓度和比例的激素。 ①无机营养成分:水和无机盐 ②有机营养成分:蔗糖、氨基酸、维生素 ③特定浓度和比例的激素(主要是生长素和细胞分裂素)。 注意:蔗糖的作用:提供能量,调节渗透压。
五、植物体细胞杂交技术
概念:将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的技术。
主要步骤:植物细胞融合和植物组织培养。
原理:细胞膜流动性和植物细胞具有全能性。
酶解法
纤维素酶
果胶酶
原生质体融合方法
①物理法:电融合法、离心法等。
②化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法等。
细胞融合完成的标志:再生出新的细胞壁。
杂交完成的标志:培育出杂种植株。
再生出细胞壁的相关的细胞器:高尔基体和线粒体验证再生出新壁的实验:质壁分离和质壁分离复原实验
1.植物体细胞杂交的生殖方式:无性生殖2.植物体细胞杂交的分裂方式:有丝分裂3.植物体细胞杂交的涉及的可遗传变异类型:染色体变异4.诱导融合后的产物有三类:未融合的细胞、两两融合的细胞、多细胞融合体5.植物体细胞杂交的意义:打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种等方面
展示出独特的优势。6.杂种植株包含两个物种的全部遗传物质,各种基因都包含在内,却未按照人们的要求表现出亲本所有的性状,例如“番茄-马铃薯”并没有地上结番茄,地下长马铃薯,这是因为:生物体内基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,杂种植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达相互干扰,它们不能像在原植株细胞内实现有序表达,因此不能按照人们的要求表现出亲本所有的性状。
注意
六、植物细胞工程的应用
(一)