内容正文:
第3章第2节 第1课时 筛选和获取目的基因与构建基因表达载体
必备知识基础练
1.利用PCR技术从某种生物的基因组DNA中获取目的基因。有关这一过程,下列说法错误的是( )
A.以含有目的基因的DNA片段作为模板
B.目的基因的一段核苷酸序列已知,以便根据这一序列合成两种引物
C.有足够的脱氧核苷酸作为原料
D.加入足够数量的DNA连接酶进行指数式扩增
2.[2023江苏无锡高二校联考期中]RT—PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,可利用此技术获取目的基因,具体过程如图所示,以下说法错误的是( )
A.设计扩增目的基因的引物时需考虑目的基因两端的碱基序列
B.G/C含量高的引物在与模板链结合时,复性的温度较高
C.该技术用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度
D.过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、耐高温的DNA聚合酶和引物A等
3.PCR技术是在DNA聚合酶的作用下,在体外进行DNA大量扩增的一种分子生物技术。下列叙述正确的是( )
A.双链DNA在高温下氢键和磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链
B.温度降低后,单链DNA和引物结合的部分碱基序列相同
C.以2条DNA单链为模板,以4种NTP为原料,经耐高温酶在高温下合成2个新的DNA
D.设置PCR仪的温度进行反应可重复循环多次,DNA呈指数式扩增
4.关于基因表达载体构建的叙述,下列说法不正确的是( )
①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子 ②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA ③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止 ④所有基因表达载体的构建都是完全相同的
A.②③
B.①④
C.①②
D.③④
5.在重组DNA技术中,将外源基因导入受体细胞,通常是利用质粒作为载体。下列关于质粒的叙述,正确的是( )
A.质粒是一种只存在于原核细胞中的结构简单的环状DNA分子
B.目的基因直接导入受体细胞则难以在受体细胞中表达
C.目的基因只有通过质粒整合到受体细胞的DNA中才能表达
D.大多数天然质粒都不需要人工改造,可以直接作为载体使用
6.在基因工程的操作过程中,获得重组质粒不需要( )
①DNA连接酶 ②限制酶 ③RNA聚合酶 ④具有标记基因的质粒 ⑤目的基因 ⑥四种脱氧核苷酸
A.③⑥
B.②④
C.①⑤
D.①②④
7.某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内,来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:A是抗链霉素基因,B是抗氨苄青霉素基因,且目的基因要插入基因B中,而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是( )
A.导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒
B.研究过程需要使用限制酶、DNA连接酶和载体这些专门的工具酶
C.可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
8.环境雌激素(EEs)会影响动物和人类的性腺发育。斑马鱼在EEs的诱导下,会表达出卵黄蛋白原(vtg)。已知绿色荧光蛋白(GFP)基因能使斑马鱼发光,欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼,下列操作合理的是( )
A.将EEs基因的启动子与GFP基因重组
B.将vtg基因的启动子与GFP基因重组
C.将GFP基因的启动子与GFP基因重组
D.将GFP基因的启动子与vtg基因重组
9.DNA疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因(如图甲)插入适宜的质粒(如图乙)中得到的重组DNA分子,将其导入人体内,在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答,且可持续一段时间。限制酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位点如下图所示。下列分析正确的是( )
A.构建DNA疫苗时,可用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒
B.图乙中只用EcoRⅠ切割质粒产生的DNA片段具有相同平末端
C.用EcoRⅠ切割目的基因和质粒,再用DNA聚合酶连接,会产生多种连接产物
D.抗原基因在体内表达时,需要经过转录和翻译过程,会发生氢键断裂和形成
10.请回答下列相关基因工程中构建基因表达载体的问题。
(1)培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体,其目的是使目的基因在受体细胞中 ,并且可以通过复制遗传给下一代,同时,使目的基因表达和发挥作用。
(2)构建基因表达载体时,可利用 酶连接被限制酶切开的 键。
(3)组成基因表达载体的单体是 。基因表达载体中的启动子是 识别和结合的部位,在结合完成后才能驱动目的基因通过 (填过程)合成mRNA。目的基因表达的翻译过程的终止信号是 。
能力素养提升练
11.像BclⅠ(5'-T↓GATCA-3')、BglⅡ(5'-A↓GATCT-3')