2024届高考生物一轮复习导学案 微生物的培养与应用

高2024级高考 一轮总复习·生物 姓名： 使用时间： 微生物的培养与应用 【全国卷内容要求】 1.阐明无菌技术在微生物培养中的应用 2.概述微生物分离和培养的常用方法 3.概述测定微生物数量的常用方法 4.实验:通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落 5.实验:分离土壤中分解尿素的细菌,并进行计数 强基础 增分策略 一、微生物的实验室培养 1.培养基 (1)概念:人们按照微生物对　　　　　　的不同需求,配制出供其　　　　　　的营养基质。  (2)营养组成:一般都含有　　　　　　　　　和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对　　　、氧气以及　　　　　　　　的要求。  特别提醒 微生物对主要营养物质的需求特点 ①自养型微生物所需的营养物质主要是无机盐,碳源可来自大气中的CO2;氮源可由含氮无机盐(如硝酸盐等)提供。 ②异养型微生物所需的营养物质主要是有机物,即碳源必须由含碳有机物提供,如糖类、脂肪酸等;氮源也主要由有机物(如尿素、牛肉膏等)提供,部分异养型微生物也可以利用无机氮源。 (3)配制原则 2.无菌技术 (1)含义:在培养微生物的操作中,所有防止　　　　　的方法。 (2)常用方法 3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)计算:依据配方比例,计算配制100 mL的培养基时,　　　　　的用量。  (2)称量:准确地称取　　　　　。  (5)倒平板:待培养基冷却至　　℃左右时,在　　 　　　　　倒平板。  4.大肠杆菌的纯化培养 (1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成　　　　　,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。  (2)常用接种方法 ①　　　　　法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面 ②稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释后,将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,进行培养 a.系列稀释操作 b.涂布平板操作 (3)菌种的保存方法 问题思考 1.(选修1 P17“讨论2、3”)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 2.(选修1 P17“讨论4”)在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 3.(选修1 P18“讨论3”)平板划线法在做第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?目的是什么? 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 易错辨析 (1)配制培养基时,应根据微生物的种类调整培养基的pH。(　　) (2)倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上。(　　) (3)为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。(　　) (4)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质。(　　) (5)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。(　　) (6)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(　　) (7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就能在培养基表面形成单个菌落。(　　) 二、微生物的筛选和计数 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)实验原理 (2)实验流程 (3)统计细菌数目的方法 ①显微镜直接计数法 ②间接计数法：稀释涂布平板法——活菌计数法 原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的　　　　　　。通过统计平板上的　　　　　　,就能推测出样品中大约含有多少活菌。  特别提醒 ①选用菌落数相差不大的平板计算平均值,一般选用菌落数在30~300的稀释度下的平板进行计数。 ②设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,应设置三个以上的重复组。 ③当两个或多个细胞连在一起时,培养后平板上观察到的只是一个菌落,所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目少,因此