内容正文:
第一节 体液调节是通过化学信号实现的调节
第一节 体液调节是通过化学信号实现的调节
第三章 动物细胞工程
依据植物细胞的全能性原理,能够在细胞水平上克隆植物,培育植物新品种。那么,能利用动物细胞培养技术克隆出动物个体吗?如果将不同种动物的细胞融合,能够培育出具有新性状的动物个体吗?轰动世界的克隆羊“多莉”是如何培育出来的?通过“试管婴儿”技术孕育出新生儿与一般的生殖过程有什么不同?本章将会揭示这些问题的答案。动物细胞工程常用的技术手段包括动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。
第一节 体液调节是通过化学信号实现的调节
第一节 体液调节是通过化学信号实现的调节
第三章 动物细胞工程
第二节 神经系统通过下丘脑控制内分泌系统
第二节 神经系统通过下丘脑控制内分泌系统
第一节 细胞培养是动物细胞工程的基础
目 录
动物细胞的适宜条件
动物细胞培养的过程
动物细胞培养的特点、应用
动物细胞工程常用的技术手段包括动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。那么,动物体细胞在体外进行培养需要什么条件?培养过程如何?
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动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
动物体
组织
单个细胞
细胞生长和增殖
取出
分散
适宜条件
(1)相关组织:
一般是指动物胚胎或幼龄动物的组织, 因为这些组织或细胞的生命力旺盛,分化程度低,分裂能力强,容易培养。
(2)适宜的培养条件:
不同的细胞、组织适合生存的环境不同,需要配置不同的培养基。
一、动物体细胞可在体外适宜条件下进行培养
1.动物细胞培养的概念
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2.原理:细胞增殖
3.动物细胞培养的适宜条件(需要更复杂的培养基和更严格的无菌条件?)
(1)温度:大多数情况下,细胞生长的最适宜温度是37℃, 温差一般不超过±0.5 ℃。达40 ℃以上,细胞很快死亡。(CO2培养箱可以提供适宜的温度和控制稳定的PH环境,模拟体内生长环境。)
一、动物体细胞可在体外适宜条件下进行培养
体外培养的细胞失去了对整体的依赖性。体内使细胞各方面都处于最佳状态。
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(2)pH:大多数细胞适宜的pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞产生有害影响。造成培养基pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2,可通过给培养箱提供恒定的5%的CO2浓度,使之与培养基中的NaHCO3处于平衡状态,调节pH的相对稳定。
(3) 95%的空气可以保证细胞呼吸对氧气的需要。
(4)无菌、无毒 的条件
①培养材料、培养基、培养环境、操作过程严格控制无菌。
②动物细胞培养液中常含有在高温条件下变性失去功能的物质,如血清等,因而对培养液的这些成分采用过滤除菌。(无菌)
③在培养基中加入抗生素能抑制细菌和真菌的生长,从而预防污染。常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素等。(无菌)
④为防止细胞代谢产生的有毒物质危害细胞,应定期更换培养液。(无毒)
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3.动物细胞的生长和增殖需要充足的营养物质。
培养动物细胞的培养基通常为液体培养基。
(1)基本成分:水、无机盐、氨基酸、维生素、糖类、生长因子等。
(2)按培养基来源分类:
根据细胞生存所需的物质种类和含量严格配置而成的培养基
动物血清:含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,可以补充合成培养基中缺乏的物质
主要来自动物体液或动物组织分离提取液,成分复杂,来源受限
实际培养时,在合成培养基中添加一定比例的动物血清
动物细胞培养最好选择固体培养基还是液体培养基?
合成培养基:
天然培养基:
液体培养基
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思考:幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?
【答案】细胞的增殖能力与供体的年龄有关,幼龄动物的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,老龄动物的细胞则相反。所以,一般来说,幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培养;分化程度越低的细胞,增殖能力越强,所以分化程度低的细胞更容易培养。
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a、无菌、无毒:
(加抗生素抑菌,定期更换培养液,清除代谢废物保证无毒 )
b、营养物质和激素:
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等)
c、适宜的温度和pH:
(37±0.5℃,PH7.2---7.4 )
d、气体环境:
O2和CO2(95%空气和5% CO2 ),加入CO2是为了维持
培养液中的PH值,加入 O