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|第二部分加练必考点热考法研究(十九)
热考法研究(十九)
聚焦基因工程,体现科技创新
高考真题集中研究明规律
Gutu3
,启动子区
编码区
非编码☒
1.(2023·新爆标卷)某同学拟用限制酶(酶1、酶2、
前
3
酶3和酶4)、DNA连接酶为工具,将目的基因(两
GEP
端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒
6肩动子区
插
编码区
:作编码区
3
进行切割,连接,以构建重组
酶3酶2
3
引物3
引物2
表达载体。限制酶的切割位
分
点如图所示。下列重组表达
抗生素
下列叙述正确的是
载体构建方案合理且效率最
商4
抗性基齿
A.Gata3基因的启动子无法控制GFP基因表达
高的是
B.翻译时先合成Gata3蛋白,再合成GFP蛋白
5'-GAATTC-3'5'-GGATCC-3'5'-CCCGGG-3'5'-AGATCT-3
C.2号条带的小鼠是野生型,4号条带的小鼠是
3-(TTA4G-5'3'-0TaGG-5'3'-GGGC0-5'3'-T0TaGA-5
Gala3-GFP基因纯合子
卧1
酶2
所3
耐4
D.若用引物1和引物3进行PCR,能更好地区分
A.质粒和目的基因都用酶3切割,用E.cl:DNA
杂合子和纯合子
连接酶连接
4,(2023·山东高考)科研人员构建了可表达JV5融
B.质粒用醇3切割、目的基因用酶1切割,用T4:
合蛋白的重组质粒并进行了检测,该质粒的部分结
DNA连接酶连接
构如图甲所示,其中V5编码序列表达标签短肽V5。
C.质粒和目的基因都用醇1和醇2切割,用T4
启动子基因巧编码序列终止子
DNA连接酶连接
Fs F
链
D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切制,用E.col
b链
DNA连接酶连接
R
注:F、F2、R1、R表示引物
抗.蛋白抗体抗5抗体
2.(2023·湖北高专)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、
四环素抗性基因(TtR)作为标记基因构建的质粒
分
如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不
(1)与图甲中启动子结合的酶是
同限制酶酶切后的质
HindⅢ
除图甲中标出的结构外,作为
Pou
粒,构建基因表达载体
-Sph I
载体,质粒还需具备的结构有
Sal I
(重组质粒),并转化到
(答出2个结构即可)。
质
受体菌中。下列叙述
(2)构建重组质粒后,为了确定J基因连接到质物
错误的是
()
中且插入方向正确,需进行PCR检测,若仅用一对
A.若用HidⅢ酶切,目的基因转录的产物可能不同:
引物,应选择图甲中的引物
已
B.若用PuI酶切,在含Tet(四环素)培养基中
知」基因转录的模板链位于b链,由此可知引物
的菌落,不一定含有目的基因
F:与图甲中J基因的
(填“a链”或“b
C.若用ShI酶切,可通过DNA凝胶电泳技术鉴
链”)相应部分的序列相同。
定重组质粒构建成功与否
(3)重组质粒在受体细胞内正确表达后,用抗J蛋
D.若用SphI酶切,携带目的基因的受体菌在含
白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达
Anmp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落
以及表达水平,结果如图乙所示。其中,出现条带
3.(2023·浙江6月选专)某研究小组利用转基因技
术,将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小!
1证明细胞内表达了
,条带2所检
(填“是”或“不是”)由重组质粒
鼠Gata3基因一端,如图甲所示。实验得到能正常
出的蛋白
表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只,交配以
上的J基因表达的
期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定
[微点拔]
交配获得的4只新生小鼠的
基因工程赋予生物新的遗传特性,是生命科学
1
2
4
基因型,设计了引物1和引物大片段
研究领域中的重点、热点,是高考必考的内容,试题
2用于PCR扩增,PCR产物小片段
难度一般是中等偏上,复习备考时,要结合现代
物科技的进展,针对不同的问题情境进行强化训练。
电泳结果如图乙所示。
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新高考方案系列丛书一书三用生物学
“四翼”考法梯度训练查短板
(3)检测上述GNA一ACA融合基因导入人棉花细胞
后是否表达出相应产物,从分子水平上,可以采用
(一)基础性考法
的检测方法是
1.农杆菌转化法是植物转基因技术中常用的转化方法
(二)综合性、应用性考法
之一。下列与该方法相关的叙述错误的是
4.猪感染PCV2(猪圆环病毒2型)后会引起呼吸道疾
A.土壤农杆菌是重组质粒的受体细胞
病综合征。Cp是PCV2引发机体免疫反应的蛋白
B.T-DNA是拟核DNA上的一段序列
质。下图为基因工程生产Cp的过程及其应用的流
C.农杆菌能侵染双子叶植物和裸子植物
程图(图中不同限制酶切割产生的末端各不相同)。
D.新鲜叶圆片与农杆菌在适宜条件下共培养,部
BamH I HindIl
分