内容正文:
选修3第2章 细胞工程(答案)
※植物组织培养技术的原理和过程?
★原理:植物细胞的全能性
过程:第一步:取合适的外植体;第二步:脱分化形成愈伤组织
第三步:再分化形成芽、根并最终发育成完整植株
※生长素和细胞分裂素的相对含量对愈伤组织的生长和分化产生的影响是?
★相对含量相当时外植体脱分化为愈伤组织/愈伤组织生长
细胞分裂素相对含量更大时愈伤组织分化出芽;生长素相对含量更大时愈伤组织分化出根
※为什么植物组织培养的过程要进行严格的无菌操作?
★用于植物组织培养的培养基同样适合某些微生物的生长。培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验失败。
※植物组织培养技术有哪些具体的应用?
★植物快速繁殖、植物脱毒、单倍体育种
※生产次生代谢产物(如紫杉醇)使用的技术是?
★植物细胞培养技术
※植物体细胞杂交的步骤?
★第一步:去除细胞壁制备原生质体(机械分离或酶解分离,常用纤维素酶或果胶酶)
第二步:通过物理或化学方法诱导其融合
第三步:诱导细胞壁再生,得到完整的杂合细胞
第四步:通过植物组织培养培养出完整的杂合植株
※原生质体融合的结果有?
★大量未融合细胞、同种融合细胞、杂合细胞
※植物体细胞杂交可以打破什么?
★生殖隔离/远缘杂交不亲和
※什么是动物细胞培养?
★从动物体内取出组织或细胞,在体外模拟体内的生理条件,使之得以生存和生长并维持其结构与功能的技术
※动物细胞培养的过程?
★第一步:通过机械法和消化法实现组织细胞的分散
消化法常用胰蛋白酶对动物组织块进行消化,使细胞从组织中分离出来
第二步:原代培养(培养的是多种细胞的混合物)
第三步:传代培养(逐步分离获得单一类型的细胞)
※动物细胞培养的过程有什么要求?
★严格无菌的环境、一定量的抗生素、适宜的培养温度和pH、95%空气和5%CO2混合气体、适宜的渗透压、营养物质、及时清除代谢产物
※植物组织培养和动物细胞培养的比较
项目
植物组织培养
动物细胞培养
理论基础
植物细胞的全能性
细胞增殖
培
养
基
类型
固体培养基
液体培养基
成分
水、无机盐、维生素、蔗糖、氨基酸、植物激素、琼脂等
糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等
取材
植物幼嫩部位或花药等
植物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织等
结果
形成新植株,可以体现细胞的全能性
只能获得大量细胞,不能形成个体
相同点
(1)两种技术手段培养过程中细胞都进行有丝分裂,都不涉及减数分裂,都是
无性繁殖,都可称为克隆
(2)均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
※植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
细胞融合方法
用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后,诱导原生质体融合
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后,诱导细胞融合
诱导手段
聚乙二醇(PEG)、电融合法
聚乙二醇、电融合法、灭活病毒诱导
结果
形成杂种植株
形成杂合细胞(无法得到个体)
应用
培育植物新品种
制备单克隆抗体
意义
突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能
※单克隆抗体及其应用
★1.传统抗体的获得
(1)方法:向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需
抗体。
(2)缺陷:产量低、纯度低、特异性差。
2.单克隆抗体的制备
(1)存在问题:浆细胞能产生抗体,但不能无限增殖;骨髓瘤细胞能无限增殖,但不能产
生抗体。
(2)解决思路:将浆细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞。既能大量增殖,又能产生足够
数量的仅针对某一特定抗原决定簇的单克隆抗体。
※单克隆抗体制备的过程?
★第一步:以特定抗原刺激小鼠的B淋巴细胞,获得了能产生抗体的浆细胞
第二步:浆细胞和骨髓瘤细胞在促融剂的作用下发生融合,形成了杂交瘤细胞(同时产生
了大量未融合细胞以及同种融合细胞)
第三步:通过选择培养基筛选出抗体分泌阳性的杂交瘤细胞,并对其进行克隆培养
※制备单克隆抗体过程中的两次筛选
★第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞
即将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及同种细胞融合的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出杂交瘤细胞。
第二次筛选(采用抗原一抗体杂交技术)的目的是将产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来。
因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时会取出多种,形成的杂交瘤细胞也就有多种,其不可能都能分泌所需抗体,所以需筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
※单克隆抗体的应用?
★多种疾病的诊断、靶向性治疗、早孕检测试纸
※克隆包括哪三种类型?
★分子克隆、细胞克隆、个体克隆
※什么是细胞核移植?
★细胞核移植是将一种动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中,并使重组