内容正文:
11月15日:必修必背十五 DNA是主要的遗传物质
1.肺炎双球菌的R型菌和S型菌有什么区别?S型菌分别使人和小鼠患什么病?
R型菌无荚膜、无毒性、菌落表面粗糙;S型菌有荚膜、有毒性、菌落表面光滑;S型菌使人患肺炎、使小鼠患败血症
2.肺炎双球菌体内转化实验的实验者是谁?得出了什么结论?转化的本质?
格里菲思;结论:加热杀死的S型菌具有使R型菌转化为S型菌的“转化因子”(注:不知道转化因子是什么);基因重组
3.肺炎双球菌的体外转化实验的实验者是谁?得出了什么结论?
艾弗里;结论:DNA是遗传物质,蛋白质、多糖等不是遗传物质
4.噬菌体是什么生物?有什么特点?它侵染大肠杆菌的步骤是?噬菌体侵染大肠杆菌的实验者是谁?
DNA病毒;专一寄生在大肠杆菌体内;吸附→注入→合成→组装→释放;赫尔希和蔡斯
5.噬菌体侵染大肠杆菌的实验过程、结论是什么?
第一步:用32P和35S分别标记噬菌体:用含32P和35S的培养基分别培养大肠杆菌,再用噬菌体侵染被标记的大肠杆菌
第二步:用32P和35S标记的噬菌体分别侵染未被标记的大肠杆菌→搅拌、离心→分别检测上清液和沉淀物中的放射性以及子代噬菌体是否具有放射性
实验结论:DNA是遗传物质(注:不能证明蛋白质不是遗传物质,因为蛋白质没有进入大肠杆菌)
6.搅拌、离心的目的分别是什么?为什么选择35S和32P标记蛋白质和 DNA?用14C和18O标记噬菌体可以吗?为什么?
搅拌:使吸附在大肠杆菌表面的噬菌体与大肠杆菌分离;离心:使上清液析出质量较轻的噬菌体,使质量较重的大肠杆菌在沉淀物中;因为蛋白质含S不含P,DNA含P不含S;不行,因为蛋白质和DNA都含C和O,这样上清液和沉淀都具有放射性,无法判定DNA和蛋白质是否分离
7.设计实验证明烟草花叶病毒的遗传物质是RNA还是蛋白质?写出实验思路、实验结果及结论。
思路:将烟草花叶病毒的RNA和蛋白质分开,再分别去侵染烟草,观察烟叶是否出现病斑;结果:RNA侵染的烟草出现病斑,蛋白质侵染的烟草未出现病斑;结论:RNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质
8.怎么理解DNA是主要的遗传物质?蓝藻的遗传物质主要是DNA对吗?为什么?
对于所有生物而言,只有RNA病毒的遗传物质是RNA,其余生物(真、原核、DNA病毒)的遗传物质都是DNA,所以说DNA是主要的遗传物质;不对,针对某一具体的生物,遗传物质唯一,蓝藻的遗传物质就是DNA
11月15日:选修必背
1.样品处理:血液由血浆和血细胞组成,其中红细胞最多。血红蛋白由四条肽链组成,包括两条α肽链和两条β肽链。其中每条肽链环绕一个亚铁血红素基团,此基团可携带一分子O2或一分子CO2。血红蛋白因含有血红素而呈红色。
①红细胞的洗涤 目的:去除杂蛋白,获得纯净红细胞。过程:血样低速短时间离心→吸出上层透明黄色血浆,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯→加入五倍体积的生理盐水→再低速短时间离心→重复三次,直至上清液不再呈现黄色→得到纯净红细胞。
注:为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入抗凝血剂柠檬酸钠。 生理盐水作用:保持红细胞渗透压稳定不破裂。 洗涤次数过少,无法除去血浆蛋白;离心速度过高和时间过长会使白细胞等一同沉淀,达不到分离的效果。
②血红蛋白的释放 目的:使红细胞破裂,释放血红蛋白。过程:红细胞加蒸馏水到原血液的体积→加40%体积的甲苯→磁力搅拌器上搅拌→红细胞破裂,释放血红蛋白
注:蒸馏水作用:使红细胞吸水涨破。 甲苯作用:加速红细胞破裂并释放出血红蛋白。
③分离血红蛋白溶液 目的:经过离心使血红蛋白与其他杂质分离开。过程:混合液高速长时离心→用滤纸过滤,除去脂溶性沉淀层→分液漏斗中静置片刻→分离出下层的红色透明液体。试管中混合液离心后分为四层,从上往下数:第1层:无色透明的甲苯层;第2层:白色薄层固体,是脂溶性物质的沉淀层;第3层:红色透明液体,是血红蛋白的水溶液;第4层:暗红色的杂质沉淀层。
2.粗分离——透析:目的:除去样品中相对分子质量较小的杂质。原理:透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。方法:将血红蛋白溶液装入透析袋中,将透析袋放入一定量适宜浓度的磷酸缓冲液中,透析12h。
3.纯化——凝胶色谱操作:目的:通过凝胶色谱法将相对分子质量不同于血红蛋白的杂蛋白除去。过程:本实验使用的是交联葡聚糖凝胶。干凝胶用蒸馏水充分溶胀,配成凝胶悬浮液。为了加速膨胀,可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热,逐渐升温至接近沸腾,这种方法不但节约时间,还可以除去凝胶中的微生物,排除胶粒内的空气。装填时可轻轻敲动色谱柱,使凝胶装填均匀。色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装,因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。装填完后,立即用磷酸缓冲液洗涤平衡凝胶,使凝胶装填紧密。样品